[發(fā)明專利]一種高效shRNA分子在抗WSSV中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210063966.0
• 申請日: 2012-03-12
• 公開（公告）號: CN102643861A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周俊芳;房文紅;萬夕和
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所
• 主分類號: C12N15/89
• 分類號: C12N15/89;A01K67/033;C12N15/113;C12N15/10
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 31233
• 代理人: 黃志達(dá);謝文凱

1.一種高效shRNA分子在抗WSSV中的應(yīng)用，包括：

將體重7～9g、PCR檢測陰性的健康南美白對蝦在室內(nèi)池塘?xí)吼B(yǎng)1周后，用胰島素注射器于南美白對蝦第四腹節(jié)的一側(cè)肌肉注射50μL/只shRNA分子，4h后于第四腹節(jié)的對側(cè)肌肉注射50μL/只WSSV感染液，在水溫27～28℃、每天換水1/2、24h持續(xù)充氣的條件下養(yǎng)殖，WSSV感染4天后檢測顯示，南美白對蝦體內(nèi)WSSV的增殖被shRNA抑制。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效shRNA分子在抗WSSV中的應(yīng)用，其特征在于：所述shRNA分子shWR的序列為：

5’-GGACCAACAAACCCAAGAAUUGAAGAAGUUCUUGGGUUUGUUGGUCCUU-3’。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效shRNA分子在抗WSSV中的應(yīng)用，其特征在于：所述shWR的制備方法包括：

(1)選取WSSV早期復(fù)制相關(guān)酶的編碼序列；

(2)利用軟件生成抗WSSV的小RNA干擾分子；

(3)按照已公布的小RNA序列設(shè)計(jì)規(guī)則，選擇一個(gè)理論上高效的小RNA分子；

(3)把該siRNA構(gòu)建成shRNA分子，記為shWR。