[發(fā)明專(zhuān)利]一種簡(jiǎn)易、快速分離好氧反硝化芽孢桿菌的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210061407.6
• 申請(qǐng)日: 2012-03-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102586156A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱杰;吳文坤;周呈祥
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 安徽聯(lián)大生物環(huán)?？萍加邢薰?/a>
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/07
• 代理公司: 安徽合肥華信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

1.一種簡(jiǎn)易、快速分離篩選好氧反硝化芽孢桿菌的方法，其特征在于：選擇如土壤、池塘水樣、?泥樣或活性污泥等目標(biāo)物接種于含有NO2^--N/NO3^—N的富集培養(yǎng)基中，進(jìn)行間歇增氧富集培養(yǎng)；然后移取適量富集培養(yǎng)物在75-80℃水浴殺除雜菌后，稀釋涂布于含NO2^--N/NO3^—N梯度平板培養(yǎng)；然后對(duì)培養(yǎng)后的平板進(jìn)行噴涂NO2^--N/NO3^—N顯色液，在平板高濃度NO2^--N/NO3^—N區(qū)域挑挑取菌落周邊無(wú)顯色或顯色淺淡菌落，繼續(xù)用劃線法獲得純培養(yǎng)物，對(duì)純培養(yǎng)物革蘭氏染色鏡檢，以?xún)?nèi)生芽孢桿菌的作為初篩菌株；接著利用純培養(yǎng)物菌體在不同NO2^--N/NO3^—N濃度的培養(yǎng)基中，恒溫間歇增氧培養(yǎng)，測(cè)定其OD600nm吸光度值，以定量的確定芽孢桿菌所適應(yīng)的NO2^--N/NO3^—N濃度范圍；在確定的適中的NO2^--N/NO3^—N濃度下，用含有NO2^--N/NO3^—N的液體富集培養(yǎng)基，分別培養(yǎng)不同好氧反硝化芽孢桿菌，通過(guò)測(cè)定液體富集培養(yǎng)基中NO2^--N/NO3^—N含量，以求解其去除率，復(fù)篩出好氧反硝氧能力強(qiáng)勁的芽孢桿菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的簡(jiǎn)易、快速分離好氧反硝化芽孢桿菌的方法，其特征在于：所述的富集培養(yǎng)基：用的是LB培養(yǎng)基2.0-200.0?mg/l?NO2^--N/NO3^—N；所述的LB培養(yǎng)基（g/l）:胰蛋白胨10.0，氯化鈉5.0,酵母膏10，水1000ml,PH?7.2，121℃，滅菌25-30min。