[發(fā)明專利]一種大黃魚白細(xì)胞介素－1β（IL-1β）基因克隆方法及其應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210059220.2
• 申請(qǐng)日: 2012-03-08
• 公開（公告）號(hào): CN102586263A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚翠鸞;王志勇;黃雪娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/25
• 分類號(hào): C12N15/25;C12N15/10;C07K14/545;A61K39/39
• 代理公司: 廈門市新華專利商標(biāo)代理有限公司 35203
• 代理人: 朱凌

1.一種大黃魚白細(xì)胞介素－1β（IL-1β）基因，其特征在于：具有序列表中SEQ?ID?NO.1堿基序列及SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列。

2.一種如權(quán)利要求1所述的大黃魚白細(xì)胞介素－1β（IL-1β）基因的克隆方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)?從大黃魚的腎臟組織中提取總RNA；

(2)?然后進(jìn)行cDNA第一鏈合成；

(3)?根據(jù)其他魚類IL-1β的保守序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，得到大黃魚IL-1β基因片段，其中正向引物F1：5’?GYCAACCTCRTCATCGCC?3’，反向引物R1：5’?CTGCTCARCWTCWTGYTGGAG??3’?；

(4)?又用2條基因特異性正向引物F2：5’_?GTGCTGGAGAACATAGTGGAAG?3’，F(xiàn)3：5’?GGGCTGAGAACCGCAAAG?3’進(jìn)行大黃魚IL-1βcDNA?3’端快速擴(kuò)增（3’RACE）；

(5)?然后用3條基因特異反向引物R2：5’?AGCCCAGTGTCTTGTTTG?3’和R3：5’?AAGGTTGGGTCGTTGTCC?_3’，R4：5’?GCCCTTGATACCCAGAGCC?3’?進(jìn)行對(duì)大黃魚IL-1β?cDNA?5’端克隆。

3.一種如權(quán)利要求1所述的大黃魚白細(xì)胞介素－1β（IL-1β）基因的應(yīng)用，其特征在于：所述的大黃魚白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）基因，具有提升大黃魚抗病力的功能。