[發明專利]一種研究黃芩組織培養快速繁殖的方法

無效

• 申請號: 201210057290.4
• 申請日: 2012-03-07
• 公開（公告）號: CN102550422A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 徐根娣;于浩;吳俊燕
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于植物組織培養領域，尤其涉及一種研究黃芩組織培養快速繁殖的方法。

背景技術

黃芩具有清熱瀉火、消炎鎮痛等藥理作用，在臨床上療效確切，作為常用的藥材品種，應用歷史悠久，需求數量較大。目前，黃芩產業已經形成具有一定規模、結構較為完整的產業體系，特別是近年來呈現出快速增長態勢，成為醫藥經濟產業中重要的組成部分。

近幾年來，市場上對黃芩供不應求的矛盾日益突出，這是由于臨床上對黃芩藥材的需求量逐年上升，而現實是有限的黃芩野生資源遭到掠奪性挖掘后的日益匱乏，同時該植物繁殖速度慢，加之少有栽培，并且缺乏可行的組織培養技術對黃芩進行繁殖，尚未獲得黃芩愈傷組織誘導的最佳外植體及培養基配方。

發明內容

本發明提供了一種研究黃芩組織培養快速繁殖的方法，旨在解決目前黃芩的野生資源日益匱乏，繁殖速度慢，加之少有栽培，市場上供不應求的矛盾日益突出，并且缺乏可行的組織培養技術對黃芩進行繁殖，尚未獲得黃芩愈傷組織誘導的最佳外植體及培養基配方的問題。

本發明的目的在于提供一種研究黃芩組織培養快速繁殖的方法，所述方法包括以下步驟：

對黃芩的種子進行處理，獲得接種外植體；

對外植體進行消毒處理；

對培養基配方進行篩選；

對黃芩的愈傷組織進行誘導；

篩選出最佳外植體和最佳激素組合。

本發明提供的研究黃芩組織培養快速繁殖的方法，首先對黃芩的種子進行處理，獲得接種外植體，其次對外植體進行消毒處理，同時設計培養基配方，在無菌條件下對黃芩的愈傷組織進行誘導，篩選出最佳外植體和最佳激素組合，為利用組織培養技術對黃芩進行快速、大規模繁殖提供了可能，有效地解決了目前黃芩的野生資源日益匱乏，繁殖速度慢，市場供不應求等日益突出的矛盾，同時也解決尚未獲得黃芩愈傷組織誘導的最佳外植體及培養基配方等問題，方法簡單可行，操作性強，為建立黃芩組培再生體系奠定了基礎。

附圖說明

圖1示出了本發明實施例提供的研究黃芩組織培養快速繁殖的方法的實現流程圖；

圖2示出了本發明實施例提供的對外植體進行消毒處理的實現方法的流程圖；

圖3示出了本發明實施例提供的對培養基配方進行篩選實現方法的流程圖；

圖4示出了本發明實施例提供的對黃芩的愈傷組織進行誘導的實現方法的流程圖。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對本發明進行進一步的詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定發明。

圖1示出了本發明實施例提供的研究黃芩組織培養快速繁殖的方法的實現流程。

該方法包括以下步驟：

在步驟S101中，對黃芩的種子進行處理，獲得接種外植體；

在步驟S102中，對外植體進行消毒處理；

在步驟S103中，對培養基配方進行篩選；

在步驟S104中，對黃芩的愈傷組織進行誘導；

在步驟S105中，篩選出最佳外植體和最佳激素組合。

在本發明實施例中，對黃芩的種子進行處理，獲得接種外植體的實現方法為：

將種子在光照培養箱中培養，白天溫度為25℃左右，光強2000～2500lx光照12小時，晚上為20℃左右，每天澆水一次，保持相對濕度70％～80％左右。

待黃芩種子發芽長出4～6片真葉時，取植株的根尖、莖及葉片作為接種的外植體。

如圖2所示，在本發明實施例中，對外植體進行消毒處理的實現方法為：

在步驟S201中，將黃芩幼苗從培養箱中取出，放入盆中，用自來水沖洗；

在步驟S202中，待泥沙沖洗干凈后取出，放入白瓷盤置于超凈工作臺上，取滅菌過的三角燒瓶將幼苗放入，用75％的酒精浸泡10s，棄酒精，用無菌水沖洗3次；

在步驟S203中，緊接著用0.1％升汞消毒10～12min；

在步驟S204中，去升汞后再用無菌水沖洗5～6次，置于無菌的培養皿中，獲得無菌外植體進行接種。

如圖3所示，在本發明實施例中，對培養基配方進行篩選實現方法為：

在步驟S301中，經預實驗后選6個不同激素組合配方進行外植體接種；

在步驟S302中，在比較了愈傷組織誘導效果后，從以上6個不同激素組合配方中選出一個配方；

在步驟S303中，再進行梯度試驗確定適宜黃芩愈傷組織誘導的最佳培養基配方。

在本發明實施例中，6個不同激素組合配方如下：