[發明專利]從多潛能干細胞誘導膽堿能神經元的方法

有效

• 申請號: 201210056400.5
• 申請日: 2012-03-06
• 公開（公告）號: CN103305458A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 景乃禾;岳偉
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: C12N5/0735
• 分類號: C12N5/0735;C12N5/071;C12N5/0793;A61K35/30;A61P25/28;A61P25/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種制備含基底前腦膽堿能神經元或其前體的細胞群的方法，包括：

(1)培養多潛能干細胞，形成擬胚體；和

(2)培養擬胚體，以骨形態發生蛋白9和音猬因子誘導；獲得含基底前腦膽堿能神經元或其前體的細胞群。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，培養擬胚體6±1天后，以音猬因子誘導；或

培養擬胚體8±1天后，以骨形態發生蛋白9誘導。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，在加入骨形態發生蛋白9的2±1天后，收獲細胞群，該細胞群為含基底前腦膽堿能神經元前體的細胞群；或

在加入骨形態發生蛋白9后2±1后，進行單細胞貼壁培養；單細胞貼壁培養4±2天后收獲細胞群，該細胞群為含基底前腦膽堿能神經元的細胞群。

4.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，骨形態發生蛋白9誘導6±2天；和/或

音猬因子誘導4±2天。

5.如權利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，

所述的音猬因子的終濃度是300±200ng/ml；和/或

所述的骨形態發生蛋白9的終濃度是5-10ng/ml。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的多潛能干細胞選自：胚胎干細胞或誘導多能干細胞。

7.一種含基底前腦膽堿能神經元或其前體的細胞群，其通過權利要求1-6任一所述的方法制備獲得。

8.權利要求7所述的含基底前腦膽堿能神經元的細胞群的用途，用于制備增加腦內基底前腦膽堿能神經元的組合物。

9.一種藥物組合物，其包括：

權利要求7所述的含基底前腦膽堿能神經元或其前體的細胞群；以及

藥學上可接受的載體。

10.一種音猬因子和骨形成蛋白9的用途，用于以多潛能干細胞作為起始細胞來制備含基底前腦膽堿能神經元的細胞群。