[發(fā)明專利]檢測樣品中的甲基化DNA的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210055737.4 | 申請日: | 2012-02-28 |
| 公開(公告)號: | CN102653787A | 公開(公告)日: | 2012-09-05 |
| 發(fā)明(設計)人: | 酒井綾子;梶田昌裕 | 申請(專利權)人: | 希森美康株式會社 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038 | 代理人: | 羅菊華 |
| 地址: | 日本*** | 國省代碼: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 樣品 中的 甲基化 dna 方法 | ||
1.檢測樣品中的甲基化DNA的方法,其包括:
使有含甲基化DNA的可能性的樣品和可與甲基化DNA結合的蛋白質接觸,從而使上述樣品中的甲基化DNA和上述蛋白質結合;
使通過上述結合步驟得到的樣品和至少1種脫氧核糖核酸酶接觸,而將上述樣品中的DNA分解;及
在通過上述分解步驟得到的樣品中,通過與上述蛋白質的結合來檢測不被上述脫氧核糖核酸酶分解的甲基化DNA;其中
上述脫氧核糖核酸酶的至少1種是與可分解單鏈DNA的甲基化感受性限制酶不同的脫氧核糖核酸酶。
2.權利要求1所述的方法,其中
上述可與甲基化DNA結合的蛋白質是抗甲基化DNA抗體或甲基化DNA結合蛋白質。
3.權利要求1所述的方法,其中
上述可與甲基化DNA結合的蛋白質是抗甲基化DNA抗體。
4.權利要求1所述的方法,其中
上述可與甲基化DNA結合的蛋白質是選自下列的至少1種甲基化DNA結合蛋白質:MBD1、MBD2、MBD4及MeCP2。
5.權利要求1~4之任一項所述的方法,其中
上述樣品是由培養(yǎng)細胞株或從活體采集的血液、體液、組織或細胞制備的樣品。
6.權利要求1~4之任一項所述的方法,其中
上述脫氧核糖核酸酶是選自下列的至少1種:脫氧核糖核酸酶I、外切核酸酶I、λ-外切核酸酶、T7外切核酸酶、外切核酸酶III、RecJ型外切核酸酶、外切核酸酶T、BAL31核酸酶、綠豆核酸酶、微球菌-核酸酶及T7內切核酸酶。
7.權利要求1~4之任一項所述的方法,其中
上述樣品是有含單鏈甲基化DNA的可能性的樣品,
在檢測上述甲基化DNA的步驟中,檢測單鏈甲基化DNA。
8.權利要求1~4之任一項所述的方法,其中
在檢測上述甲基化DNA的步驟中,使用核酸擴增法、堿基測序法或微陣列法來檢測甲基化DNA。
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