[發明專利]一種乳酸片球菌CCFM7902及其用途

有效

• 申請號: 201210054656.2
• 申請日: 2012-03-05
• 公開（公告）號: CN102559563A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 陳衛;趙建新;田豐偉;張灝;王剛;張秋香;劉小鳴;陳海琴;宋元達;寧佳
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/14;A23L1/317;A23L1/315;A23L1/314;C12R1/01
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所 11305
• 代理人: 向華

1.一種乳酸片球菌(Pediococcus?acidilactici)CCFM7902，該菌菌株已于2011年11月29日在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC?No.5493。

2.根據權利要求1所述的乳酸片球菌CCFM7902，其特征在于它具有下述性質：

(1)具有耐酸性，在pH3.0下能存活；

(2)具有耐膽鹽能力，能耐受的膽鹽濃度達0.3％；

(3)在體外對單核細胞增生李斯特菌生長具有抑制作用；

(4)對單核細胞增生李斯特菌在食品中的生長具有抑制作用；

(5)對單核細胞增生李斯特菌感染腸上皮細胞株HT-29細胞具有保護作用；

(6)對單核細胞增生李斯特菌感染小鼠的肝脾具有保護作用。

3.根據權利要求1所述的乳酸片球菌CCFM7902在使用含有該菌株的工作發酵劑生產青貯飼料與發酵香腸中的用途。

4.根據權利要求3所述的用途，其特征在于在所述工作發酵劑中乳酸片球菌CCFM7902的濃度是10⁹cfu/g以上。

5.根據權利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的工作發酵劑是按照下述方法制備得到的：

按照以MRS液體培養基重量計1～2％接種量，將乳酸片球菌CCFM7902原始菌種接種于MRS液體培養基中，在溫度37℃的條件下培養20-28h進行活化，連續以相同方式進行活化2-3代，得到活化培養物，然后按照以MRS液體培養基重量計1-3％接種量再接種于MRS培養基中，在溫度37℃的條件下培養20-28h，接著在溫度2-6℃與轉速3500-4500r/min的條件下進行離心12-18min，去除上清夜，收集菌泥，然后，往所述的菌泥中加入凍干保護劑懸液，調整菌液濃度為10⁹cfu/ml，混勻后裝入凍干瓶中，在溫度?-80℃的條件下預凍2-6h，然后轉入真空冷凍干燥機進行凍干，于是得到所述的工作發酵劑，它在溫度4℃下保存。

6.根據權利要求5所述的用途，其特征在于所述的凍干保護劑懸液是按照下述方法制備得到的：

將脫脂乳、海藻糖與去離子水按照重量比為1∶1∶8進行混合溶解，得到的溶液在溫度115℃的條件下滅菌10min，得到所述的凍干保護劑懸液，它在溫度4℃下保存。

7.根據權利要求3所述的用途，其特征在于所述的青貯飼料是按照下述步驟制備的：

首先，將青貯飼料原料揉切至1～4cm后待用。

然后，將0.5重量份根據權利要求5所述方法制備的工作發酵劑溶入到200-250重量份溫度30℃-40℃的水中，攪拌溶解得到一種工作發酵劑懸液；

接著，把該工作發酵劑懸液噴灑到2000重量份的青貯飼料原料中，翻拌均勻，將青貯飼料原料的水含量控制在以重量計65％-75％；當飼料原料的水含量超過其范圍時，讓飼料原料在日光下晾曬，使其含水量達到其范圍；當飼料原料的水含量低于其范圍時，往其飼料原料中噴灑水，使其含水量達到其范圍；

最后，把如此處理的青貯飼料原料裝入青貯飼料桶中壓實，然后密封，在常溫下發酵3-4周后，得到含有乳酸片球菌CCFM7902的青貯飼料。

8.根據權利要求3或7所述的用途，其特征在于所述的飼料原料是一種或多種選自稻草、玉米秸稈、高粱秸稈、小麥秸稈、天然牧草、栽培牧草、田間雜草、菜葉類、水生植物或嫩枝樹葉的青貯飼料。