[發明專利]脂肪酸-RGD-脂肪醇偶聯物介導表阿霉素靶向脂質體制備及抗腫瘤活性評價

有效

• 申請號: 201210054432.1
• 申請日: 2012-03-02
• 公開（公告）號: CN102532262A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 崔國輝;崔純瑩;吳曼
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K5/09
• 分類號: C07K5/09;C07K1/113;A61K47/42;A61K9/127;A61K31/337;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 王為

技術領域

本發明涉及靶向釋藥載體，尤其涉及脂肪酸-RGD-脂肪醇介導靶向藥物載體及其構建方法，本發明還涉及藥物載體在制備靶向抗腫瘤藥物脂質體中的應用，屬于生物醫藥學領域。

背景技術

許多惡性腫瘤的生長和轉移均與整合素表達異常或分子結構改變相關。整合素是一跨膜蛋白大家族，由α、β兩種亞基構成異二聚體。目前發現α約有18種，β約有8種，至少有24種異二聚體的整合素形式。整合素在腫瘤的進展可能具有兩重性：1)腫瘤發生早期，整合素表達降低可致瘤細胞與基底膜或ECM成分的粘附作用減弱，從而有利于腫瘤在局部生長與擴散；2)瘤細胞進入血循環后，整合素表達增高有利于瘤細胞粘附于血管內皮，繼而定位增殖。整合素在腫瘤細胞表面的表達高于正常細胞是公認的事實。

已知，精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列(Arg-Gly-Asp，RGD)是整合素特異識別序列片段，RGD三肽及修飾物通過與整合素特異結合，具有阻止腫瘤細胞定位增殖、抗腫瘤新生血管生成作用。

脂質體(liposome)是直徑50～1000nm的球型脂質雙層，磷脂膜的組成成分靈活，可以制成種類、大小、表面特征不同的多種類型，作為生物活性物質的有效運輸載體。親水性藥物可以包容在脂質體的水核內，脂溶性藥物可以嵌入磷脂雙層間，中性藥物可以通過調整脂質體內的pH值或通過添加反相離子與藥物形成分子復合物而穩定地結合于脂質體內。

普通脂質體不具有靶向性。如在脂質體表面結合抗體、配體，利用腫瘤細胞與正常細胞表面表達的抗原受體的差異，通過抗原、抗體和受體、配體的特異性作用增加脂質體的主動靶向性，這樣可以提高治療指數。

抗腫瘤藥物的主動靶向性制劑將是改進抗腫瘤藥物制劑的新趨向。為了使載體系統具有特異靶向性，可將各種活性物質耦聯到載體表面。借助這種特異性相互作用可將載有各種抗腫瘤藥物的載體系統靶向到含有特異性受體的器官、組織或細胞；同時受體與配體結合可促進載體系統內藥物釋放到腫瘤細胞內。

發明內容

本發明涉及一種作為錨點化合物的偶聯化合物，其化學式如下：CH₃(CH₂)nCO-Arg-Gly-Asp-OCH₂(CH₂)₁₀CH₃，其中，n＝4-16。

優選的偶聯化合物，n＝6，8，10，12，14。

本發明還包括所述的作為錨點化合物的偶聯化合物的方法，包括：將Arg-Gly-Asp與脂肪酸鏈進行綴合，再與十二醇進行綴合，即得。

本發明還涉及一種抗腫瘤藥物靶向脂質體，含有所述的作為錨點化合物的偶聯化合物。

進一步的，所述的抗腫瘤藥物靶向脂質體，由以下各組分組成：抗腫瘤藥物，磷脂，膽固醇和錨點化合物的偶聯化合物。

進一步的，所述的抗腫瘤藥物靶向脂質體，由以下組分制成，下述百分比均為質量百分比：抗腫瘤藥物2-8％，磷脂70-80％，膽固醇10-20％和權利要求1或2所述的作為錨點化合物的偶聯化合物為3-10％。

進一步的，抗腫瘤藥物為：表阿霉素，阿霉素，吡喃阿霉素，紫杉醇，多西紫杉醇，柔紅霉素阿克拉霉素、光輝霉素中的一種或多種。

進一步的，磷脂為：卵磷脂，大豆磷脂，二棕櫚酰磷脂酰膽堿，二硬脂酰磷脂酰膽堿中的一種或多種。

本發明涉及一種制備上述抗腫瘤藥物靶向脂質體的方法，包括：將除抗腫瘤藥物之外的其他各組分用氯仿溶解，旋轉蒸發去除溶劑，加入150mmol·L^-1(NH₄)₂SO₄溶液，超聲分散，得空白脂質體混懸液。將空白脂質體置透析袋中透析4-5次，每次透析約10h，取出透析內液置于茄瓶中；另精密稱取抗腫瘤藥物適量，溶于水中，將此溶液加入至空白脂質體混懸液，混勻，于熱水浴中放置，振搖，即得。

本發明涉及所述的具有兩親性的脂肪酸-RGD-脂肪醇綴合物在制備抗腫瘤靶向脂質體藥物中的應用。

本發明涉及所述的靶向脂質體等各種藥物載體在制備治療腫瘤的藥物中的用途。

本發明涉及以腹水瘤S180小鼠為模型，采用尾靜脈給藥的治療方案評價所述的抗腫瘤靶向脂質體制劑的抗腫瘤活性，結果顯示靶向脂質體比各對照組具有更優異的抗腫瘤活性。

本發明涉及以肝癌細胞HepG2為模型，采用MTT法評價所述的抗腫瘤靶向脂質體制劑的抗腫瘤活性，結果顯示靶向脂質體比各對照組具有更優異的抗腫瘤活性。