[發明專利]一種適合葉際細菌和真菌PCR擴增的簡便、高效DNA提取方法無效
| 申請號： | 201210053974.7 | 申請日： | 2012-03-05 |
| 公開（公告）號： | CN103289987A | 公開（公告）日： | 2013-09-11 |
| 發明（設計）人： | 馬安周;潘建剛;齊鴻雁;莊國強;白志輝 | 申請（專利權）人： | 中國科學院生態環境研究中心 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100085 北京市海淀區*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 適合 細菌 真菌 pcr 擴增 簡便 高效 dna 提取 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種適合葉際細菌和真菌PCR擴增的簡便、高效DNA提取方法。其核心是：i：葉際微生物細胞的分離和收集；ii：微生物細胞的破碎；iii：蛋白和核酸的分離；iv：蛋白抽提；v：DNA自然晾干時間適中。
2.權利要求1葉際微生物細胞的分離和收集要注意以下幾點：一、磷酸緩沖液pH為7.5；二、適量的吐溫-80溶液的添加；三、適中的超聲波震蕩的頻率和時間。
3.權利要求1所述的微生物細胞的破碎方法：Fast?prep振蕩器在最大速度下振蕩45s。
4.權利要求1所述的蛋白和核酸的分離：加適量的20％SDS溶液溫浴過程中，要注意不時地輕微振蕩溶液，以提高分離效果。
5.權利要求1所述蛋白抽提次數要重復2-3次，以提高雜質去除效果。而且在取上清液時，切記不要吸入中間蛋白相。
6.權利要求1所述的DNA自然晾干時間適中：務必保證酒精去處干凈且DNA不易過于干燥。
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