[發明專利]胰腺癌易感基因無創檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201210053674.9
• 申請日: 2012-03-01
• 公開（公告）號: CN102586447A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 潘加奎;鄭俊斌
• 申請（專利權）人: 解碼(上海)生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測胰腺癌易感基因的無創檢測試劑盒，其組成成分為：XPC基因上單核苷酸多態性位點PAT(未缺失/雜合缺失/純和缺失)，MTHFR基因上單核苷酸多態性位點C677T(rs1801133)，CYP2E1基上單核苷酸多態性位點RsaI(rs2031920)，GSTT1基因是否缺失(Null/Present)基因型的PCR特異引物與DNA測序引物、Taq酶、dNTP混合液、反應緩沖液、SAP酶、ExoI酶、BigDye?mix、EDTA溶液、70％乙醇溶液、100％乙醇溶液、HIDI溶液、ddH₂O等。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特點在于：所述的特異性引物對是指針對XPC基因上單核苷酸多態性位點PAT(正常/雜合缺失/純和缺失)，MTHFR基因上單核苷酸多態性位點C677T(rs1801133)，CYP2E1基上單核苷酸多態性位點RsaI(rs2031920)，GSTT1基因是否缺失(Null/Present)，能特異性擴增出包含4個SNPs位點的DNA片段的引物對。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特點在于：所述的DNA測序引物是針對XPC基因上單核苷酸多態性位點PAT(正常/雜合缺失/純和缺失)，MTHFR基因上單核苷酸多態性位點C677T(rs1801133)，GYP2E1基上單核苷酸多態性位點RsaI(rs2031920)，GSTT1基因是否缺失(Null/Present)，能通過DNA測序技術特異性檢測出上述4個SNPs位點基因型的DNA測序引物。

4.根據權利要求1所示的試劑盒，其所含的4對特異性引物序列如下：

(1)XPC?PAT(+/-)正向引物：5′-TAGCACCCAGCAGTCAAAG-3′

???XPC?PAT(+/-)反向引物：5′-TGTGAATGTGCTTAATGCTG-3′

(2)MTHFR(C677T)正向引物：5′-AGGGAGGCTTCAACTACGC-3′

???MTHFR(C677T)反向引物：5′-GCGGTTGAGGGTGTAGAAGT-3′

(3)CYP2E1(RsaI)正向引物：5′-AAGTGATTTGGCTGGATTGTA-3′

???CYP2E1(RsaI)反向引物：5′-ATACAGACCCTCTTCCACCTT-3′

(4)GSTT1(Null/Present)正向引物：5′TTCCTTACTGGTCCTCACATCTC3′

???GSTT1(Null/Present)反向引物：5′TCACCGGATCATGGCCAGCA3′。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所含的4條DNA測序引物序列如下：?

(1)XPC?PAT(+/-)測序引物：5′-TAGCACCCAGCAGTCAAAG-3′

(2)MTHFR(C677T)測序引物：5′-AGGGAGGCTTCAACTACGC-3′

(3)CYP2E1(RsaI)測序引物：5′-AAGTGATTTGGCTGGATTGTA-3′

(4)GSTT1(Null/Present)測序引物：5′TTCCTTACTGGTCCTCACATCTC3′。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于試劑盒的組分和含量包括：

(1)PCR反應體系：10×PCR反應緩沖液2.5ul，25mM?dNTP混合液0.2ul，5U/ul?Taq?DNA聚合酶0.125ul，20uM特異性引物對，每條引物各0.25ul，ddH₂O?19.175ul。

(2)PCR產物純化體系：1U/ul?SAP酶0.75ul，10U/ul?ExoI酶0.375ul，ddH₂O?3.875ul。

(3)測序反應體系：25％BigDye?mix1ul，3.2uM?DNA測序引物1ul，125mMEDTA溶液1ul，100％乙醇溶液15ul，70％乙醇溶液30ul，HIDI溶液8ul，ddH₂O2ul。

本試劑盒供一人份檢測應用，試劑盒的保存溫度為-20℃。?