[發(fā)明專利]一種胸腺法新化合物及其新制法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210052504.9
• 申請日: 2012-03-02
• 公開（公告）號: CN102617727A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陶靈剛;趙雁鴻
• 申請（專利權(quán)）人: 海南靈康制藥有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/22;C07K1/16;A61K38/22;A61P1/16;A61P37/02
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 劉冬梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種胸腺法新化合物及其新制法，通過該新制法可以得到高純度的胸腺法新，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

胸腺法新(Thymosin?α1，也稱胸腺肽α1)是胸腺素主要的生物活性成分，為體內(nèi)重要的免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)，是氮端乙酰化的28個氨基酸組成的多肽，按干燥品計算，含胸腺肽α1(C₁₂₉H₂₁₅N₃₃O₅₅)不少于95.0％。研究表明，胸腺法新促進(jìn)骨髓干細(xì)胞發(fā)育分化為原淋巴細(xì)胞及前淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分化與成熟，使已成熟的T細(xì)胞進(jìn)一步分化為幾個不同的亞群，如殺傷細(xì)胞、記憶細(xì)胞、效應(yīng)細(xì)胞、輔導(dǎo)T淋巴細(xì)胞等，并產(chǎn)生各種可溶性介質(zhì)；增強淋巴細(xì)胞對有絲分裂素的反應(yīng)，并可增加淋巴組織的蛋白質(zhì)和核酸的合成；增加r-IFN、a-IFN、IL-2、IL-3和淋巴毒素的生成，增強抗病毒和抗腫瘤的免疫反應(yīng)；抑制自身免疫反應(yīng)；恢復(fù)抑制性T細(xì)胞的功能。目前胸腺法新已被廣泛應(yīng)用于臨床，治療多種疾病，如用于慢性乙型肝炎的治療；用于丙型肝炎、肝細(xì)胞癌、惡性黑色素瘤的治療；用于治療感染性疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤等的治療。

CN?1390853A公開了一種制備胸腺肽的工藝方法，其步驟如下：對新鮮的胸腺勻漿液加入pH?2.0-4.0的緩沖溶液，以抑制酶活性；在10℃以下用超聲波，勻質(zhì)機或超細(xì)技術(shù)對新鮮的胸腺組織進(jìn)行處理，以破碎細(xì)胞；冷凍離心，得離心液經(jīng)截流分子量為6000-10000的超濾柱進(jìn)行超濾，得粗制品；應(yīng)用納濾技術(shù)，將超濾液濃縮10倍以上。但是這種工藝要經(jīng)過一段時間的微波加熱，勢必會破壞其中胸腺肽的活性。

CN?101921331A公開了一種胸腺肽的制備方法，其步驟為：用pH?3.5-4.0的緩沖液將胸腺洗滌干凈，再加入pH?3.5-4.0的緩沖液低溫勻漿，制備胸腺勻漿液；得到的勻漿液經(jīng)過熱變性離心除去雜蛋白，然后用鹽酸調(diào)節(jié)上清液pH至4.5-5.0，再次離心，調(diào)節(jié)上清液pH值至中性；得到的中性上清液經(jīng)過不同的濾膜過濾，除去雜質(zhì)和細(xì)菌，凍干，得到胸腺肽成品。這種方法制備的胸腺肽步驟多，工藝復(fù)雜，制作成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

CN?101602802A公開了一種胸腺法新脫鹽的工藝，其是使用離子交換的方法脫去胸腺法新樣品的鹽分，其工藝步驟為：將胸腺法新溶液調(diào)節(jié)pH至酸性，再將酸化后的胸腺法新溶液與陽離子交換樹脂混合，用水洗脫離子交換樹脂；再用堿性溶液洗脫交換樹脂，收集在230nm波長處有吸收的洗脫液，濃縮干燥，得脫鹽胸腺法新。該方法只是將鹽洗脫，為簡單的洗脫方法，并不改變其純度，實用性不大。

可以看出，現(xiàn)有技術(shù)的方法或者步驟繁多，不適合工業(yè)生產(chǎn)；或者收率較低，耗費了大量的原料，造成成本高昂，或使用了毒性溶劑，造成藥物的毒性殘留，影響了制劑產(chǎn)品質(zhì)量。

另外，雖然目前獲得的胸腺法新最高純度可以達(dá)到99.6％甚至更高一點，但這只能通過特殊的純化方式獲得，一般制備或提取方法獲得的胸腺法新例如由于生產(chǎn)工藝控制不當(dāng)?shù)仍蚣兌炔⒉桓撸蚨膊贿m合直接使用，而且即使純化后的胸腺法新若存放不當(dāng)或存放時間過長時，也會導(dǎo)致藥物活性成分含量降低，色澤加強，有關(guān)物質(zhì)的含量升高，特別是若有高分子雜質(zhì)，會出現(xiàn)致敏性和不明生理反應(yīng)。因此有必要對不合格的產(chǎn)品或粗品進(jìn)一步進(jìn)行純化，以提供高純度的化合物。本領(lǐng)域迫切需要研究出一種低成本、純化度高、適用于大規(guī)模制備胸腺法新的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種胸腺法新化合物的純化方法，不使用昂貴和有害的試劑以及苛刻的反應(yīng)參數(shù)和條件，工藝簡單，產(chǎn)品純度高，毒性溶劑殘留低，易于工業(yè)化生產(chǎn)，進(jìn)而也能夠提高制劑產(chǎn)品質(zhì)量，減少毒副作用。

本發(fā)明人經(jīng)過長期認(rèn)真的研究，經(jīng)過組合應(yīng)用特定的方法并優(yōu)化參數(shù)后，意外發(fā)現(xiàn)了一種純化胸腺法新的方法，獲得理想的純度。本發(fā)明提供的精制方法所針對的胸腺法新是目前已知的合成方法所制得的胸腺法新粗品或者市售的胸腺法新原料藥或其過期產(chǎn)品，以下也可稱為原料胸腺法新。

具體而言，為了提高原料胸腺法新(或其粗品)的純度，本發(fā)明提供一種純化胸腺法新的方法，包括以下步驟：

步驟1，將胸腺法新粗品溶解于醇類溶劑或三氟乙酸中，加入pH?2.0-4.0的緩沖溶液，加入活性炭吸附，過濾，收集濾液，減壓濃縮，獲得一次濃縮液；

步驟2，將上述濃縮液用制備型中性氧化鋁色譜柱進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，依次用板框和濾膜過濾，然后再將濾液用超濾膜超濾濃縮，獲得二次濃縮液；