[發(fā)明專利]利用SCAR標(biāo)記鑒定甘蔗抗黑穗病性方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210051544.1
• 申請日: 2012-03-02
• 公開（公告）號: CN102586440A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 闕友雄;許莉萍;徐景升;陳如凱
• 申請（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊

1.一種利用SCAR標(biāo)記鑒定甘蔗抗黑穗病性的方法，包括基因組DNA的提取、SCAR-PCR標(biāo)記的檢測體系建立和SCAR-PCR產(chǎn)物的檢測，其特征在于：

SCAR-PCR標(biāo)記的檢測：使用的檢測引物是甘蔗SCAR-F和SCAR-R，其中SCAR-F

是5′-CTTTGTTTCCCGTAGTGTCTTGT-3′，SCAR-R是5'-ATAGCCTGCCTTCTCTCCTTT-3'；???

（2）SCAR-PCR標(biāo)記的檢測建立：SCAR-PCR擴增體系為總體積25?μl，內(nèi)含2.5?μl?10×PCR緩沖液，2.5?μl?25?mmol/L?MgCl₂，0.5?μl?10?mmol/L?dNTP，10?mmol/L?的檢測引物SCAR-F和SCAR-R各1.0?μl，1.25?U?Taq?DNA?Polymerase，20-50?ng基因組DNA，ddH₂O補足到25?μl；?SCAR-PCR擴增程序如下：94?℃?4?min；94?℃?1?min，58?℃?1?min，72?℃?2?min，30個循環(huán)；72?℃10?min；所述10×PCR緩沖液組成成分為100?mmol/L?pH8.5?Tris-HCl，500?mmol/L?KCl和15?mmol/L?MgCl₂；

????（3）SCAR-PCR產(chǎn)物的檢測：電泳檢測的SCAR-PCR擴增圖譜中，在分子量為331?bp的位置出現(xiàn)DNA條帶，為甘蔗感黑穗病的標(biāo)志；在分子量為331?bp的位置未出現(xiàn)DNA條帶，為甘蔗抗黑穗病標(biāo)志。