[發(fā)明專利]中國鱟素組成型酵母表達載體及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210051429.4 | 申請日: | 2012-03-01 |
| 公開(公告)號: | CN103233035A | 公開(公告)日: | 2013-08-07 |
| 發(fā)明(設計)人: | 韓文瑜;馮新;雷連成;宋戰(zhàn)昀;刁昱文;趙紅蕾;高宇 | 申請(專利權)人: | 吉林大學 |
| 主分類號: | C12N15/81 | 分類號: | C12N15/81;C12N15/66 |
| 代理公司: | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100 | 代理人: | 白冬冬 |
| 地址: | 130062 吉*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 中國 組成 酵母 表達 載體 及其 制備 方法 | ||
1.一種中國鱟素組成型酵母表達載體的制備方法,其特征在于:根據tachyplesins基因的測序結果設計引物TP?I-NNX1和TP?I-NNX2,含如下酶切位點:
上游引物TP?I-NNX1:5’-CCGC|TCGAGAAAAGAAAATGGTGCTTCCGTGTTTG-3’
Xho?I
下游引物TP?I-NCX2:5’-GCT|CTAGATTAACGGCAACGACGGTAGCAG-3’
Xba?I
根據pGAPZα使用手冊合成通用引物:
上游引物5’?pGAP:5’-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3’
下游引物3’AOX1:5’-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3’
對TP?I基因的克隆質粒pMD-18T-TP?I和酵母表達載體pGAPZα?A進行雙酶切,回收酶切目的片段,用T4?DNA連接酶連接,連接產物轉化大腸桿菌DH5α,篩選陽性轉化子,提取質粒,進行PCR和雙酶切鑒定,并進行測序。
2.?由權利要求1的方法獲得的中國鱟素組成型酵母表達載體pGAPZα?A-TPI。
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