[發明專利]用于檢測3-甲基喹噁啉-2-羧酸的單克隆抗體及酶聯免疫方法與試劑盒有效
| 申請號： | 201210045175.5 | 申請日： | 2012-02-27 |
| 公開（公告）號： | CN102585005A | 公開（公告）日： | 2012-07-18 |
| 發明（設計）人： | 袁宗輝;張西亞;彭大鵬;王玉蓮;潘源虎;黃玲利;陳冬梅;陶燕飛;劉振利;周琪 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C07K16/44 | 分類號： | C07K16/44;C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武漢開元知識產權代理有限公司 42104 | 代理人： | 樊戎 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 甲基 喹噁啉 羧酸 單克隆抗體 免疫 方法 試劑盒 | ||
1.一種能識別3-甲基喹噁啉-2-羧酸的單克隆抗體，其特征在于，它是由保藏號為CCTCC?NO：C201147的雜交瘤細胞MQCA?GA/5B10所分泌的。
2.權利要求1所述的雜交瘤細胞MQCA?GA/5B10，保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCC?NO：C201147。
3.包含權利要求1所述的單克隆抗體的試劑盒。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，該試劑盒是檢測3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯免疫試劑盒。
5.一種檢測3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯免疫方法，包括免疫原、包被原、抗體的制備以及樣品的處理和檢測，其步驟如下：
(1)將半抗原3-甲基喹噁啉-2-羧酸與牛血清白蛋白偶聯得到免疫原；
(2)將半抗原3-甲基喹噁啉-2-羧酸與卵清蛋白偶聯得到包被原；
(3)用步驟(1)的免疫原免疫小鼠，通過細胞融合與篩選得到保藏號為CCTCC?NO：C201147的雜交瘤細胞MQCA?GA/5B10；
(4)用保藏號為CCTCC?NO：C201147的雜交瘤細胞MQCA?GA/5B10制備單克隆抗體；
(5)用步驟(2)的包被原包被固相載體；
(6)將待測樣品先用含10％偏磷酸的5％甲醇溶液提取，再用乙酸乙酯萃取，然后用飽和食鹽水洗滌乙酸乙酯，取乙酸乙酯用氮氣吹干，殘渣用樣品稀釋液溶解，得到待測物；
(7)對步驟(6)的待測物進行酶聯免疫檢測，
其中：
樣品稀釋液的組分及配比為：NaCl?8.0g、KH2PO4?0.2g、Na2HPO4·12H2O?2.9g、KCl?0.2g，加雙蒸水至1000mL。
6.權利要求1所述的單克隆抗體在制備檢測3-甲基喹噁啉-2-羧酸的酶聯免疫試劑盒中的應用。
7.權利要求3或4所述的試劑盒在動物組織3-甲基喹噁啉-2-羧酸殘留檢測中的應用。
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