[發明專利]酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法

有效

• 申請號: 201210041951.4
• 申請日: 2012-02-23
• 公開（公告）號: CN102580353A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 趙永綱;金米聰;陳曉紅
• 申請（專利權）人: 寧波市疾病預防控制中心
• 主分類號: B01D15/22
• 分類號: B01D15/22
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 周烽

技術領域

本發明涉及一種固相萃取柱的制備方法，尤其涉及一種酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法。

背景技術

酚類環境雌激素作為制備環氧樹脂和聚碳酸酯塑料的添加劑，進入生物體內可造成內分泌失調，危害生物體生殖機能或引發惡性腫瘤，提高與激素相關的癌癥并發率，其生物雌激素效應與環境毒性已引起國內外研究者的廣泛關注。最新研究表明，0.1μg/L甚至更低量級的酚類環境雌激素可引起實驗動物的生物效應，干擾生物體中內源性激素的分泌，其低劑量效應研究已成為當前酚類環境雌激素研究的一個重要方向。鑒于此，開展痕量酚類環境雌激素的富集凈化與檢測技術研究有益于促進衛生檢驗技術的進步。

由于酚類環境雌激素樣品基質復雜、種類繁多、含量甚微（pg級），因此樣品的富集凈化技術成為其分析監測中的關鍵步驟。目前，酚類環境雌激素樣品預處理的常用方法包括：液液萃取和固相萃取。固相萃取比液液萃取富集效率高、消耗有機溶劑少、操作簡單和易于自動化等優點。然而，傳統的固相萃取小柱多采用C₁₈、改性二氧化硅、三氧化二鋁等顆粒作為填料，對酚類環境雌激素的富集效果及選擇性較差。因此，設計對酚類環境雌激素具有高選擇性和高富集倍數的固相萃取小柱對于其富集凈化與檢測技術的進步具有十分重要的現實意義。

分子印跡聚合物（Molecularly?Imprinted?Polymers，MIPs）主要是利用分子印跡技術制備的具有高親和性和高選擇性的可以識別和結合目標分子的特定受體。MIPs依靠形狀、大小和化學功能基的分布對模板分子進行識別，具有專一選擇性，因其制備方法多樣、工藝相對容易控制、特異選擇性強、具有結構和功能的可預期性、可調控性、可裁剪性而被廣泛用于樣品中酚類環境雌激素的分離富集。R.?Zhu等報道了（R.?Zhu,?W.?H.?Zhao,?M.?J.?Zhai,?et?al.,?Anal.?Chim.?Acta?2010,?658,?209.），以雙酚A為模板分子、二氧化硅為載體的用于富集分離污水中雙酚A的納米級分子印跡聚合物。Y.?S.?Ji?等報道了（Y.?S.?Ji,?J.?J.?Yin,?Z.?G.?Xu,?et?al.,?Anal?Bioanal?Chem.?2009,?395,?1125.），以磁性納米四氧化三鐵為載體，以雙酚A為模板分子，在外磁場作用下可以實現快速、有效的固液分離的納米四氧化三鐵磁性分子印跡聚合物。目前，關于酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法尚未見報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法。本發明制備工藝簡單、專一選擇性強、富集效率高；所制備的酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱對水樣和食品樣品中殘留的痕量酚類環境雌激素具有很高的選擇性和極強的富集能力，并且可以顯著降低基質效應。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：一種酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法，該方法包括以下步驟：

（1）將100~500mg酚類環境雌激素分子印跡聚合物與5~20mL純有機溶劑混合，振蕩5~30min后，超聲5~30min至混合均勻，移至聚丙烯等材質的固相萃取小柱中，裝填均勻后，兩端分別用篩板封堵。

（2）將100~500mg?傳統固相萃取填料與5~20mL純有機溶劑混合，振蕩5~30min后，超聲5~30min至混合均勻，移至步驟1的固相萃取小柱中，裝填均勻后，頂端用篩板封堵，用5~20mL酸性有機溶劑上柱清洗，然后用5~20mL純有機溶劑上柱清洗，以除去酸性物質。

（3）將步驟2的固相萃取小柱用惰性氣體吹掃除去殘留的有機溶劑，然后30~90℃真空干燥1~24小時，制得酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱。

本發明的有益效果是：本發明所制備的酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱，具有制備工藝簡單、專一選擇性強、富集效率高的優點，并將其應用于富集生活飲用水及食品中殘留的痕量酚類環境雌激素，能達到較高的富集倍數并可有效的降低基質效應。

附圖說明

圖1是根據本發明實施例，得到6種酚類環境雌激素的多反應監測（MRM）色譜圖，圖中，（1）雙酚A；（2）己烯雌酚；（3）己烷雌酚；（4）4-叔辛基酚；（5）戊酸雌二醇；（6）4-壬基酚。

具體實施方式

本發明酚類環境雌激素分子印跡固相萃取柱的制備方法，包括以下步驟：