[發明專利]用于分選帶有X或Y染色體富集群的精子懸浮液

有效

• 申請號: 201210040778.6
• 申請日: 2005-03-29
• 公開（公告）號: CN102586179A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: C·L·路德維格;K·S·克勞利;C·N·格拉維斯
• 申請（專利權）人: 英格朗公司
• 主分類號: C12N5/076
• 分類號: C12N5/076
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

1.制備性別富集的精子細胞懸浮液的方法，包括將精子細胞懸浮液與抑制運動性的組合物混合以形成化學不運動的精子細胞懸浮液，用DNA選擇性染料染色所述化學不運動的精子細胞懸浮液，以及分選染色的化學不運動的精子細胞懸浮液以形成帶有X染色體或帶有Y染色體的精子細胞的活的、性別富集的授精群，所述精子細胞具有與其DNA相結合的DNA選擇性染料。

2.權利要求1的方法，其中染料從由Hoechst?33342、Hoechst?33258、SYBR-14、以及雙苯甲亞胺-綴合物6-{[3-((2Z)-2-{[1-(二氟硼烷基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-基]亞甲基}-2H-吡咯-5-基)丙酰基]氨基}-N-[3-(甲基{3-[({4-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H，3’H-2，5’-雙苯并咪唑-2’-基]苯氧基}乙酰基)氨基]丙基}氨基)丙基]己酰胺組成的組中選擇。

3.權利要求1的方法，其中在分選方法中通過抑制運動性的含有碳酸鹽源的組合物使得化學不運動的精子細胞懸浮液化學不運動。

4.權利要求3的方法，其中在分選方法中通過抑制運動性的含有NaHCO₃、KHCO₃和C₆H₈O₇·H₂O的組合物使得所述化學不運動的精子細胞懸浮液化學不運動。

5.權利要求4的方法，其中在分選方法中通過抑制運動性的含有水中0.097mol/L?NaHCO₃、0.173mol/L?KHCO₃、0.090mol/L?C₆H₈O₇·H₂O的組合物使得所述化學不運動的精子細胞懸浮液化學不運動。

6.權利要求1的方法，其中在懸浮液中所述帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的活的、性別富集的授精群的精子濃度為至少1.25×10⁸精子/ml。

7.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為至少1.5×10⁸精子/ml。

8.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為至少1.75×10⁸精子/ml。

9.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為小于約9.0×10⁵精子/ml。

10.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為小于約7×10⁵精子/ml。

11.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為小于約5×10⁵精子/ml。

12.權利要求1的方法，所述在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為小于約2×10⁵精子/ml。

13.權利要求1的方法，其中在懸浮液中帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的所述活的、性別富集的授精群的精子濃度為小于約1×10⁵精子/ml。

14.權利要求1的方法，其中所述活的精子懸浮液包含活的冷凍的精子。

15.權利要求1的方法，其中所述帶有X染色體的精子細胞或帶有Y染色體的精子細胞的活的、性別富集的授精群的濃度是小于約1×10⁶精子/ml或至少為約1×10⁸精子/ml的在懸浮液中的精子。

16.權利要求1的方法，其中在分選方法中在包含鉀和鈉的懸浮液中使得化學不運動的精子細胞懸浮液化學不運動，其中鉀與鈉的摩爾比大于各1∶1。