[發明專利]高純度氯化兩面針堿的制備及其質量控制方法

有效

• 申請號: 201210040706.1
• 申請日: 2012-02-22
• 公開（公告）號: CN103087070A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 劉布鳴;黃艷;賴茂祥;莫建光;柴玲;林霄;陳明生
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中醫藥研究院
• 主分類號: C07D491/056
• 分類號: C07D491/056;G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 廣西南寧明智專利商標代理有限責任公司 45106
• 代理人: 馮菁

1.一種高純度氯化兩面針堿制備方法，其特征在于：包括以下工藝過程：以粉碎后的兩面針根為原料，加酸性乙醇溶液回流提取三次，第一次加酸性乙醇10－15倍量，加熱回流2－5小時；第二次和第三次加酸性乙醇5－8倍量，分別加熱回流2－5小時；合并酸醇提取液，回收乙醇，繼續濃縮至稠膏狀，用氯仿反復研磨，所得沉淀用甲醇溶解，加鹽酸至pH調節為2－3，放置后析出淡黃綠色針狀結晶，用甲醇重結晶，即可得到氯化兩面針堿粗結晶，再用甲醇溶解，超聲30－60分鐘，加熱至80－100℃，趁熱過濾，濾液放冷，靜置24小時重結晶，析出純度90－95%淡黃色細針狀結晶，再將粗結晶用制備高效液相色譜法分離純化，色譜柱為C－18柱，利用乙腈－0.1%三氟乙酸為流動相洗脫，流速為5－10?mL/min，檢測波長為271nm，柱溫為25－35℃；收集氯化兩面針堿組分，并對所收集的每一份洗脫液利用HPLC檢測，合并保留時間相同而且純度在90%－98%之間和純度大于98%以上的氯化兩面針堿組分，減壓濃縮，得到純度90%－98%之間以及大于98%以上的氯化兩面針堿；

所述的酸性乙醇的鹽酸重量含量為10－30%鹽酸，乙醇重量含量為40－80%，pH=3－4。

2.根據權利要求1所述的高純度氯化兩面針堿制備方法，其特征在于：所述的乙腈－0.1%三氟乙酸流動相洗脫重量配比為20:80～40:60。

3.根據權利要求1所述的高純度氯化兩面針堿制備方法，其特征在于：所述的HPLC檢測為：色譜柱：C－18柱；流動相：乙腈:0.1%三氟乙酸；檢測波長：271nm；流速：0.6?mL/min?～1.5mL/min。

4.一種高純度氯化兩面針堿的質量控制方法，其特征在于：采用薄層色譜分析方法和HPLC分析方法。

5.根據權利要求4所述的高純度氯化兩面針堿的質量控制方法，其特征在于：所述的薄層色譜分析方法是：薄層板：硅膠G－0.8%羧甲基纖維素鈉，三種展開劑系統：系統（1）氯仿-甲醇比例（12:1－6:1）；系統（2）氯仿-乙醇比例（10:1－5:1）；系統（3）乙酸乙酯-乙醇比例（15:1－8:1），點樣：在同一板上，按20mg、40mg、60mg、80mg、100mg不同的濃度梯度點樣，置展開缸飽和15min，分別展開，展距：15cm，定位：噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光（365nm）下檢視，在薄層色譜中，三種展開劑系統，五個不同濃度的梯度點樣，均為單一斑點，未見雜質斑點。

6.根據權利要求4和5所述的高純度氯化兩面針堿的質量控制方法，其特征在于：所述的HPLC分析方法：色譜條件：C－18柱，4.6×25cm；流速：0.6－1.5ml/min；進樣量：10－20ml；面積歸一化法定量；系統（1）流動相：乙腈:0.1%三氟乙酸溶液比例（33:67－20:80）；檢測波長：271nm；?系統（2）?流動相：乙腈:0.1%三氟乙酸比例（33:67－20:80）；檢測波長：254nm；系統條件（3）流動相：甲醇:0.1%三氟乙酸比例（50:50－30:70）；檢測波長：271nm；

含量與純度測定：精密稱取于105℃干燥至恒重的對照品適量，加流動相制成每1ml含1mg的溶液，在測定條件下，注入液相色譜儀，用兩個流動相溶劑系統分別記錄色譜圖至主成分的出峰保留時間的2.5倍以上，用面積歸一化法計算含量，結果測定對照品含量均在98%以上.雜質檢查，除溶劑峰外，雜質峰面積總和結果均小于2.0%；

所述的峰純度檢測：取對照品適量，按系統（1），在高效液相色譜儀上，用二極管陣列DAD檢測器進行峰純度檢查，HPLC色譜圖（>98%），其色譜峰的紫外吸收光譜圖、三維圖譜以及5點光譜圖完全重合，表明為單一純物質峰。