[發(fā)明專利]中藥材中鄰苯二甲二丁酯的檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210039969.0
• 申請(qǐng)日: 2012-02-22
• 公開（公告）號(hào): CN102608243A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周鴻立;郭向明;張揚(yáng);張艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林化工學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/08
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種在中藥材中鄰苯二甲酸二丁酯采用氣相色譜的檢測(cè)方法，屬于分析測(cè)試領(lǐng)域。

背景技術(shù)

鄰苯二甲酸酯類(PAEs)是增塑劑的主體。因增大產(chǎn)品的可塑性和柔韌性而廣泛地應(yīng)用于日常生活中。過去一直認(rèn)為PAEs毒性低，但近年來(lái)對(duì)動(dòng)物毒性試驗(yàn)的研究結(jié)果表明，PAEs具有生殖毒性、胚胎毒性和遺傳毒性等，尤以人體生殖功能異常最為引人注目。由于PAEs在環(huán)境中殘留期較長(zhǎng)，生物對(duì)其有富集作用，我國(guó)已將PAEs家族中的鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)和鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)確定為環(huán)境優(yōu)先控制污染物。《國(guó)家飲用水標(biāo)準(zhǔn)》(GB5749-2006)要求DEHP＜0.008mg/L，DBP＜0.003mg/L，DEP＜0.3mg/L。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)食品塑料包裝材料中PAEs分析比較重視，研究的較多，主要以提高檢測(cè)效率，其中前處理技術(shù)主要有固相萃取(SPE)凈化、超臨界萃取(SFE)，凝膠色譜(GPC)、加速溶劑萃取(ASE)、凈化體積阻滯色譜(SEC)；測(cè)試技術(shù)主要采用氣相色譜法(GC)、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)等。但在中藥材化學(xué)成分研究中偶見酞酸酯類環(huán)境激素的報(bào)道，對(duì)其來(lái)源及限量要求未見闡述。人們長(zhǎng)期服用含有此類環(huán)境激素的食品或中藥材，可能構(gòu)成潛在的遠(yuǎn)期危害，由于藥品的服務(wù)對(duì)象還不同于食品，所以更應(yīng)該引起重視。

由于鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)具有較高極性、低揮發(fā)及不活潑特性，且在模擬遷移介質(zhì)中的含量較低，給HPLC、LC-MS、GC和GC/MS帶來(lái)難度；另外，GC-MS和LC/MS，設(shè)備昂貴，成本高，很難在基層實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。

因此，建立適于基層實(shí)驗(yàn)室藥材中PAEs的測(cè)定方法是非常必要的。本發(fā)明采用GC-FID測(cè)定中藥材中的DBP，以滿足基層實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的需求，擴(kuò)大樣本量，探明其來(lái)源及解決辦法，及早制定限量標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明利用GC方法的靈敏度高，分離效果好，定量準(zhǔn)確，但為克服鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的缺點(diǎn)，本法對(duì)樣品采用超聲輔助提取，進(jìn)行二次凈化的辦法，即采用二氯甲烷-水相液液分配凈化以除去水溶性雜質(zhì)，后再經(jīng)ODS-C₁₈固相柱除去少部分脂溶性雜質(zhì)的凈化方法，并保證了本方法具有良好的精密度和重現(xiàn)性。

目前食品包裝袋中鄰苯二甲酸酯的檢測(cè)方法及其相關(guān)研究較多，而對(duì)中藥材中鄰苯二甲酸二丁酯的研究未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了檢測(cè)在中藥材中常見增塑劑污染狀況，本發(fā)明提供一種涉及鄰苯二甲酸二丁酯在中藥材中采用氣相色譜檢測(cè)方法。該方法簡(jiǎn)捷、快速，準(zhǔn)確、靈敏，檢測(cè)限和適用范圍完全滿足目前檢測(cè)限量的要求。具體檢測(cè)步驟如下：

(1)樣品溶液的制備

稱取粉碎后中藥材5.00g(40目)，放入100mL圓底燒瓶中后加入二氯甲烷浸泡0.5h，超聲振蕩15-35min，然后在60℃下回流，1h，提取2次，合并提取液，濃縮至原體積的1/4～1/6，加水分散萃取，萃取液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水，過濾，濃縮。吸取1mL樣品萃取液過預(yù)先用二氯甲烷活化過的500mg/3mLODS固相萃取柱進(jìn)行濃縮富集，上樣完畢后，用3mL二氯甲烷洗脫，洗脫速率為1mL/min，用10mL氮吹管收集洗脫液，氮吹濃縮至1mL，過0.45μm的一次性針筒式微膜過濾器，氣相色譜直接進(jìn)樣分析。

二氯甲烷體積的加入根據(jù)藥材的性質(zhì)，以藥材應(yīng)完全浸入溶劑中為準(zhǔn)。

(2)色譜條件

色譜柱為HP-5，進(jìn)樣口溫度為270-290℃，F(xiàn)ID溫度為290-310℃。柱溫：采用程序升溫，柱箱初始溫度150℃保持3.0min，以20.0℃/min升溫到200℃，保持30.0min。載氣：N₂，流量為1.8-2.2mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為1.0μL。

(3)鄰苯二甲酸二丁酯儲(chǔ)備液的制備

精密稱取DBP，至10mL容量瓶，用二氯甲烷定容，置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液可以保存6個(gè)月。

(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

以二氯甲烷為溶劑，采用逐級(jí)稀釋的方法配制標(biāo)準(zhǔn)使用液，濃度系列為1.0000～10.0000mg/mL。在選定的色譜條件下，進(jìn)樣1.0μL，分別以DBP的色譜峰面積(Y)與濃度(X)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y＝1860.3x+722.3，相關(guān)系數(shù)為0.99993。

(5)定性分析按照(1)確定的分析條件，對(duì)DBP標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣測(cè)定，以保留時(shí)間作為定性依據(jù)。

(6)精密度試驗(yàn)