[發(fā)明專利]一種測(cè)定蔗汁中α-葡聚糖含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210039378.3
• 申請(qǐng)日: 2012-02-21
• 公開（公告）號(hào): CN102590210A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 班甲;陳駿佳;胡雪梅;徐曉燕;張衛(wèi)東;孟飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州甘蔗糖業(yè)研究所
• 主分類號(hào): G01N21/82
• 分類號(hào): G01N21/82
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 譚英強(qiáng)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測(cè)定蔗汁中α-葡聚糖含量的方法。

背景技術(shù)

α-葡聚糖是由腸膜明串珠菌利用蔗汁中的蔗糖發(fā)酵產(chǎn)生的多糖類物質(zhì)，主鏈由α-D吡喃葡萄糖通過α-1-6糖苷鍵構(gòu)成。當(dāng)蔗汁中的α-葡聚糖含量達(dá)到一定程度時(shí)，其高粘性會(huì)引起蔗汁過濾、濃縮、結(jié)晶等后續(xù)操作困難，同時(shí)還造成糖分的大量損失。因此，定量分析蔗汁中的α-葡聚糖含量具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。蔗汁中α-葡聚糖含量的測(cè)定方法，主要有羅伯特銅法、旋光法、酶解色譜法、抗體法等。羅伯特銅法需反復(fù)洗滌、多次過濾，操作步驟過多，結(jié)果誤差大；旋光法與酶解色譜法測(cè)定需要專門的儀器，且適用于高α-葡聚糖含量的蔗汁；抗體法所必需的抗體價(jià)格昂貴，測(cè)定時(shí)需要配備專門的濁度儀。有些其他的方法則受蔗汁成分的影響較大，通常用于原糖或白糖中α-葡聚糖含量的檢測(cè)，用于蔗汁中α-葡聚糖含量測(cè)定時(shí)，難以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種測(cè)定蔗汁中α-葡聚糖含量的方法。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種測(cè)定蔗汁中α-葡聚糖含量的方法，包括以下步驟：

1）空白對(duì)照蔗汁的制備：在蔗汁中加入淀粉酶與α-葡聚糖酶，充分反應(yīng)，其中，蔗汁、淀粉酶、α-葡聚糖酶三者的體積比為2000:(1-1.5):(1-1.5)；

2）待測(cè)樣品蔗汁的制備：在蔗汁中加入淀粉酶，充分反應(yīng)，其中，蔗汁、淀粉酶兩者的體積比為2000:(1-1.5)；

3）在步驟1）得到的蔗汁液體中加入濃度為8-12%的三氯乙酸與助濾劑，其中，三氯乙酸的加入量與步驟1）中的加入淀粉酶與α-葡聚糖酶之前的蔗汁體積比為0.3-0.4:1，將其混合均勻并過濾，并將得到的空白對(duì)照蔗汁濾液分成多份，向各份空白對(duì)照蔗汁濾液中加入α-葡聚糖溶液，使得各份濾液中的α-葡聚糖的含量呈梯度變化，再于其中分別加入無水乙醇，其中，無水乙醇與濾液的體積比為0.9-1.5:1；

4）工作曲線的繪制：測(cè)量步驟3）中得到的含α-葡聚糖的空白對(duì)照蔗汁濾液的濁度，以各濾液中的α-葡聚糖濃度同濁度值的關(guān)系作圖，得到α-葡聚糖在在蔗汁中的工作曲線；

5）在步驟2）得到的蔗汁液體中加入濃度為8-12%的三氯乙酸與助濾劑，其中，三氯乙酸的加入量與步驟1）中的加入淀粉酶與α-葡聚糖酶之前的蔗汁體積比為0.3-0.4:1，將其混合均勻并過濾，再于其中分別加入無水乙醇，其中，無水乙醇與濾液的體積比為0.9-1.5:1，再測(cè)量濾液的濁度值；

6）利用步驟4）得到的工作曲線，結(jié)合上步得到的濾液的濁度值，換算出待測(cè)樣品蔗汁中的α-葡聚糖含量。

步驟1）中，在加入淀粉酶與α-葡聚糖酶之前，蔗汁還經(jīng)過100-200目篩過濾。

步驟2）中，在加入淀粉酶之前，蔗汁還經(jīng)過100-200目篩過濾。

所述的助濾劑為硅藻土、珍珠巖、纖維素、石棉、活性炭、酸性白土、聚丙烯酰胺中的一種。

步驟1）中，反應(yīng)時(shí)間為30-60mn，反應(yīng)溫度為60-70℃。

步驟2）中，反應(yīng)時(shí)間為30-60mn，反應(yīng)溫度為60-70℃。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的測(cè)試方法準(zhǔn)確度較高。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程簡便快捷，對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求低，適合在糖廠實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)糖汁中的α-葡聚糖含量，該方法的建立為蔗汁中α-葡聚糖的測(cè)定提供了一個(gè)快速簡便準(zhǔn)確的新途徑。

具體實(shí)施方式

一種測(cè)定蔗汁中α-葡聚糖含量的方法，包括以下步驟：

1）空白對(duì)照蔗汁的制備：在過100目篩的蔗汁（錘度15°Bx）中加入淀粉酶（novozymes?公司生產(chǎn)）與α-葡聚糖酶（阿瑪諾天野酶制劑商貿(mào)（上海）有限公司提供），置于60℃水浴中反應(yīng)30-60min，冷卻至室溫，其中，蔗汁、淀粉酶、α-葡聚糖酶三者的體積比為2000:(1-1.5):(1-1.5)，優(yōu)選的，三者的體積比為200ml:100μl:100μl；

2）待測(cè)樣品蔗汁的制備：在過100目篩的蔗汁（錘度15°Bx）中加入淀粉酶（novozymes?公司生產(chǎn)），置于60℃水浴中反應(yīng)30-60min，冷卻至室溫，其中，蔗汁、淀粉酶兩者的體積比為2000:(1-1.5)，優(yōu)選的，兩者的體積比為200ml:100μl；