[發(fā)明專利]檢測b型流感嗜血桿菌發(fā)酵液不同發(fā)酵時間剩余的葡萄糖濃度的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210036480.8 | 申請日： | 2012-02-17 |
| 公開（公告）號： | CN102621140A | 公開（公告）日： | 2012-08-01 |
| 發(fā)明（設計）人： | 羅芹;韓煉;趙丹;朱琳 | 申請（專利權）人： | 成都歐林生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/79 | 分類號： | G01N21/79 |
| 代理公司： | 成都金英專利代理事務所(普通合伙) 51218 | 代理人： | 袁英 |
| 地址： | 610000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 流感嗜血桿菌 發(fā)酵 不同 時間 剩余 葡萄糖 濃度 方法 | ||
1.檢測b型流感嗜血桿菌發(fā)酵液不同發(fā)酵時間剩余的葡萄糖濃度的方法，其特征在于：它包括以下步驟：?
A、以任一時間段的Hib發(fā)酵液的樣品作為供試品，取供試品2ml置于250ml錐形瓶中，加水25ml，精密加入堿性銅試液25ml；
B、加熱回流使其在3分鐘內沸騰，并連續(xù)沸騰5分鐘，迅速冷卻至室溫，期間保證瓶中氧化亞銅不與空氣接觸，后立即加入25%碘化鉀溶液15ml，搖勻，隨振搖隨緩緩加入硫酸溶液（1→5）25ml；
C、待二氧化碳停止放出后，立即用0.1mol/L的硫代硫酸鈉滴定液滴定，滴定至近終點時，加淀粉指示液2ml，繼續(xù)滴定至藍色消失；
D、取2ml水做一空白試驗；
E、發(fā)酵液零小時樣品葡萄糖含量測定；
F、以發(fā)酵液零小時樣品消耗滴定液的體積為100%，其余樣品消耗滴定液體積與發(fā)酵零小時樣品消耗的滴定液體積進行比較，得到發(fā)酵液不同時段剩余葡萄糖含量占初始葡萄糖含量的百分比；
其中，所述的發(fā)酵液零小時樣品葡萄糖含量測定測定包括以下子步驟：
????1）、取2ml發(fā)酵液零小時樣品，即加糖不加菌的樣品，置于250ml錐形瓶中，加水25ml，精密加入堿性銅試液25ml；
2）、加熱回流使其在3分鐘內沸騰，并連續(xù)沸騰5分鐘，迅速冷卻至室溫，期間保證瓶中氧化亞銅不與空氣接觸，立即加25%碘化鉀溶液15ml，搖勻，隨振搖隨緩緩加入硫酸溶液（1→5）25ml；
3）、待二氧化碳停止放出后，立即用0.1mol/L的硫代硫酸鈉滴定液滴定，滴定至近終點時，加淀粉指示液2ml，繼續(xù)滴定至藍色消失。
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