[發(fā)明專利]離子液體中修飾纖維素酶原位降解纖維素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210035994.1
• 申請日: 2012-02-09
• 公開（公告）號: CN102586362A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設計）人: 于世濤;李露;劉仕偉;劉福勝;解從霞;謝娟
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12N9/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種在氯化1-甲基3-丁基咪唑鹽([Bmim]Cl)離子液體下修飾纖維素酶原位酶解微晶纖維素的新方法。其特征在于：

在50-60℃下將微晶纖維素，加入到[Bmim]Cl離子液體中，得到均相溶液，纖維素占離子液體的重量比5-10％。在50-60℃下加入pH為4.8的檸檬酸緩沖液和修飾纖維素酶，檸檬酸緩沖液的加入量為離子液體質量的5-6倍，修飾纖維素酶的加入量為每毫升離子液體0.5-5mg，反應30分鐘至1小時，纖維素轉化成還原糖的轉化率在80-90％。

2.根據(jù)權利要求1所述修飾纖維素酶在[Bmim]Cl離子液體下原位酶解纖維素的方法，其特征是：在30-35℃下，在檸檬酸緩沖溶液(pH＝4.8)中，加入天然纖維素酶，待其完全溶解后，緩慢加入等質量的聚乙二醇衍生物，混合均勻后，加入聚乙二醇衍生物質量的30-50％的還原劑氰基硼氫鈉(NaCNBH₃)，恒溫反應24小時，然后加入天然纖維素酶質量20倍的甘氨酸，終止反應，通過透析純化得到修飾纖維素酶。

3.根據(jù)權利要求1所述修飾纖維素酶在[Bmim]Cl離子液體下原位酶解纖維素的方法，其特征是：采用聚乙二醇衍生物為修飾劑，具體為單甲氧基聚乙二醇丙醛，分子量分別為5000，10000，20000，分別標記為mPEG-ALD?5k，mPEG-ALD?10k，mPEG-ALD?20k；單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺，分子量為5000，標記為mPEG-SPA?5k；單甲氧基聚乙二醇馬來酰亞胺，分子量為5000，標記為mPEG-MAL?5k。