[發明專利]一種鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201210035454.3
• 申請日: 2012-02-17
• 公開（公告）號: CN102590493A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 郗日沫;田溪;孟萌;尹永梅;張波;宋佩;薛虎寅;張太昌;邢玥;王鵬;徐志環
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒，其特征在于：包括熒光標記物儲備液、DEP標準溶液、DEP多克隆抗體血清和濃縮磷酸鹽(PBS)緩沖溶液并分別封裝于試劑管中，熒光標記物儲備液為將異硫氰酸熒光素(FITC)標記DEP的熒光偶聯物溶于200μL甲醇所得的溶液并封裝于一個容積為1.5mL的試劑管中；DEP標準溶液按DEP在甲醇溶劑的不同濃度設置并分別封裝于七個容積為1.5mL的試劑管中，溶劑為甲醇，每管1mL；DEP多克隆抗體血清為600μL并封裝于一個容積為1.5mL的試劑管中；濃縮PBS緩沖溶液封裝于兩個容積為10mL的試劑管中，每個試劑管內裝液9mL。

2.根據權利要求1所述鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒，其特征在于：所述熒光標記物儲備液的配制方法是，將1mg?4-氨基-鄰苯二甲酸二乙酯與1mg?FITC在500μL質量百分比含量為25％的三乙胺的甲醇中，在4℃溫度下反應8-10小時，取上述混合溶液50μL，在薄層層析硅膠片底部畫一條帶，將此薄層層析硅膠片放入氯仿與甲醇的體積比為4∶1的展開劑中層析，然后刮下薄層層析硅膠片上Rf為0.5的帶，溶于200mL甲醇并過濾，取濾液作為熒光標記物儲備液。

3.根據權利要求1所述鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒，其特征在于：所述DEP標準溶液設置的濃度為0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL和200ng/mL，甲醇為溶劑，每管1mL；配制方法為是將0.2mg?DEP標準品溶解在1mL甲醇中配制成200ng/mL的標準溶液，然后用甲醇將200ng/mL的標準溶液梯度稀釋為100ng/mL、75ng/mL、50ng/mL、20ng/mL及10ng/mL的標準溶液，取1mL甲醇作為0ng/mL的空白對照標準溶液。

4.根據權利要求1所述鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒，其特征在于：所述DEP多克隆抗體血清的配制方法是，將DEP半抗原改造物4-氨基-鄰苯二甲酸二乙酯的氨基與牛血清蛋白偶聯制得DEP免疫抗原，將免疫抗原純化凍干后，分5次注射入新西蘭大白兔體內，心臟采血離心后，得到多克隆抗體血清，分裝后于-20℃溫度下保存。

5.根據權利要求1所述鄰苯二甲酸二乙酯熒光偏振免疫檢測試劑盒，其特征在于：所述濃縮磷酸鹽(PBS)緩沖溶液中各組分濃度為27mmol/L?KCl、1380mmol/L?NaCl、70mmol/L?Na₂HPO₄和15mmol/L?KH₂PO₄。