[發(fā)明專利]香蕉液體組織快繁技術(shù)及其專用培養(yǎng)基

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210034792.5
• 申請(qǐng)日: 2012-02-16
• 公開（公告）號(hào): CN102577955A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 廖芬;楊柳;李楊瑞;閆勇;周主貴;羅瑞宏;李小泉;林貴美;栗靜;何全光;李昌寶;游向榮;李志春;李麗;孫健;黃茂康;張娥珍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧明智專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 45106
• 代理人: 黎明天

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及香蕉組織快繁的一種新技術(shù)方法，建立相應(yīng)的培養(yǎng)技術(shù)和配套的培養(yǎng)基體系，屬于植物組織培養(yǎng)和生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

香蕉是我國(guó)也是世界上主要鮮果種類之一，每年香蕉銷量占全球總水果銷量的40％左右，需求量極大。隨著國(guó)內(nèi)種植面積的不斷擴(kuò)大，對(duì)種苗的需求量也日趨增大，經(jīng)常出現(xiàn)供不應(yīng)求的情況。目前大部分的香蕉種苗均來源于組培苗，傳統(tǒng)的香蕉組織培養(yǎng)方法為固體培養(yǎng)。操作過程中，從初培養(yǎng)到繼代培養(yǎng)，每個(gè)培養(yǎng)階段都是手工操作，生產(chǎn)過程需要大量的手工勞動(dòng)，是一種勞動(dòng)密集型技術(shù)。傳統(tǒng)培養(yǎng)方法選用的培養(yǎng)基均為固體培養(yǎng)基，需加入瓊脂等凝固劑，增加了原料成本。傳統(tǒng)培養(yǎng)方法因培養(yǎng)容器的限制，組培苗的生長(zhǎng)空間有限，一個(gè)瓶子僅能放3-5顆香蕉組培苗，且培養(yǎng)過程沒有換氣裝置，通氣不良，增殖系數(shù)有限，苗的質(zhì)量參差不齊。這些均是目前傳統(tǒng)香蕉組培苗生產(chǎn)上存在的普遍問題，也是組培苗生產(chǎn)成本較高的原因。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種香蕉組織快繁的新技術(shù)方法及配套培養(yǎng)基體系，提高組培苗的增殖倍數(shù)，縮短生根時(shí)間，不需要添加瓊脂等凝固劑，減少培養(yǎng)基原料的投入，培養(yǎng)過程半自動(dòng)化，節(jié)省勞動(dòng)力及成本。

本發(fā)明是一種香蕉液體半自動(dòng)組織快繁新技術(shù)，該技術(shù)包括增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)階段所需的間歇時(shí)間，間歇頻率等控制參數(shù)，接種密度，配套的適用于該項(xiàng)系統(tǒng)進(jìn)行香蕉液體培養(yǎng)的增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基配方。

一種香蕉液體組織快繁方法，其特征是：選用以水為主要溶劑的液體培養(yǎng)基進(jìn)行香蕉組織快繁，培養(yǎng)裝置為間歇浸沒式生物反應(yīng)器。

香蕉液體組織快繁專用培養(yǎng)基，包括增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的成分主要是在以水為主要溶劑的MS基本培養(yǎng)基溶液中，加入以下溶質(zhì)配成：6-芐基腺嘌呤(以下簡(jiǎn)稱6-BA)，萘乙酸(以下簡(jiǎn)稱NAA)和赤霉素(以下簡(jiǎn)稱GA)；

增殖培養(yǎng)基配方為：MS+6-BA?2.0mg/L+NAA0.1mg/L+30g/L蔗糖；

生根培養(yǎng)基配方為：MS+GA?1.5mg/L+NAA1.0mg/L+30g/L蔗糖。

所述增殖培養(yǎng)基中6-BA的終濃度是2.0mg/L，NAA的終濃度是0.1mg/L；

所述生根培養(yǎng)基中GA的終濃度是1.0mg/L，NAA的終濃度是1.5mg/L。

MS基本培養(yǎng)基中各溶質(zhì)濃度如下：硝酸鉀(KNO3)1900mg/L，硝酸銨(NH4NO3)1650mg/L，磷酸二氫鉀(KH2PO)170mg/L，硫酸鎂(MgSO4.7H2O)370mg/L，氯化鈣(CaCl2.2H2O)440mg/L，碘化鉀(KI)0.83mg/L，硼酸(H3BO3)6.2mg/L，硫酸錳(MnSO4.4H2O)22.3mg/L，硫酸鋅(ZnSO4.7H2O)8.6mg/L，鉬酸鈉(Na2MoO4.2H2O)0.25mg/L，硫酸銅(CuSO4.5)0.025mg/L，氯化鈷(CoCl2.6H2O)0.025mg/L，乙二胺四乙酸二鈉(Na2.EDTA)37.3mg/L，硫酸亞鐵(FeSO2.7H2O)27.8mg/L，肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，鹽酸硫胺素(VB1)0.1mg/L，鹽酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L，煙酸(VB5)0.5mg/L，蔗糖(sucrose)30g/L。

所述的香蕉液體組織培養(yǎng)技術(shù)方法，其特征是：

(1)繼代苗應(yīng)選用第7代半固體培養(yǎng)的組培苗為宜；接種密度為每株/100mL培養(yǎng)基，

(2)增殖培養(yǎng)時(shí)，間歇浸沒生物反應(yīng)器培養(yǎng)條件為：間歇時(shí)間為3小時(shí)，間歇頻率為4min/3h，增殖培養(yǎng)基的6-BA濃度為2.0mg/L；可使香蕉組織培養(yǎng)一代增殖14倍以上，遠(yuǎn)高出傳統(tǒng)方法2-3倍。

(3)生根培養(yǎng)階段，間歇浸沒生物反應(yīng)器培養(yǎng)條件為：間歇頻率為4min/6h，生根培養(yǎng)基以GA?1.5mg/L+NAA1.0mg/L，適合于誘導(dǎo)生根。