[發明專利]一種血小板生成素擬肽凍干制劑

無效

• 申請號: 201210034540.2
• 申請日: 2012-02-16
• 公開（公告）號: CN102552184A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 宋磊;劉紅軍;劉寧;陳文芳
• 申請（專利權）人: 山東泉港藥業有限公司
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K38/18;A61K47/26;A61P7/04
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 馮鐵惠

技術領域

本發明涉及一種含有血小板生成素擬肽的凍干粉針，以及相應的制備工藝。

背景技術

慢性特發性血小板減少性紫癜（ITP）是一種自身性免疫性疾病，由致血小板減少的一種自身免疫反應引起，其特征是血小板數降低，其患者面臨出血高風險，往往導致患者小血管出血，癥狀為淤青、鼻出血和牙齦出血，嚴重者可出現致命性胃腸道和腦內出血。目前治療ITP的主要手段是使用免疫抑制類藥物，如皮質類固醇、靜注免疫球蛋白、抗D免疫球蛋白和Genentech公司產品利妥昔單抗，而對嚴重衰竭性病人的最后一著則是行脾切除術。其中大多數治療藥物未曾經歷隨機安慰劑對照臨床試驗的考察，雖對不同患者群均有效，但同時也會產生嚴重的毒副反應，其作用機制是阻止血小板破壞，而非促進血小板產生。

????血小板生成素（TPO）為一種糖蛋白，主要產生于肝臟，在巨核細胞及血小板的產生中起著重要的調節作用。其與c-Mpl結合后可激活下游信號級聯反應，從而導致巨核細胞的分化和增值，且伴隨著血小板水平升高。第1代促血小板生成劑-糖基化全長重組人血小板生成素（rhTPO）和聚乙二醇化重組人巨核細胞生長及發育因子（PEG-rHuMGDF）隨之問世。其可促進健康受試者體內巨核細胞生成，并提高血小板數量，且在用于治療癌癥患者、免疫性血小板生成素減少性紫癜患者及接受非清髓性化療的癌癥患者的研究中均獲得了成功。然而，第1代促血小板生成劑可能會導致受試者體內產生抗TPO抗體，因而具有誘發血小板減少癥的風險，糖基化全長重組人血小板生成素（rhTPO）和聚乙二醇化重組人巨核細胞生長及發育因子（PEG-rHuMGDF）的開發被迫停止。此后研究人員在多肽文庫中尋找隨機、無相關性的多肽，企圖可在不產生抗TPO抗體的情況下刺激依賴于TPO的細胞株；在嘗試將篩選得到的多肽連接于各種載體分子，以增加其半衰期。由此開發出以血小板生成素擬肽為代表的第2代促血小板生成劑。血小板生成素擬肽在健康受試者及ITP患者中的試驗均獲得了成功，且試驗中亦未見受試者體內產生抗TPO抗體。

???血小板生成素擬肽為一種新型重組蛋白，可特異性結合并激活血小板生成素（TPO）受體c-Mpl,從而顯著提高血小板水平。血小板生成素擬肽含有兩個相同的亞單位，每個亞單位分別由一個IgG1?Fc結構區和c-Mpl結合區共價結合構成，且與TPO無氨基酸序列同源性，故不會在用藥者體內產生抗TPO抗體。血小板生成素擬肽的生產是利用基因工程技術構建出血小板生成素擬肽原核表達菌株，采用發酵工程技術實現了血小板生成素擬肽高密度發酵，通過蛋白質復性和純化技術純化出符合藥用級別的血小板生成素擬肽原液，配制成制劑。主要用于治療脾切除及非脾切除的成人免疫性血小板減少癥。

????但是，蛋白質藥物的生物學活性受多種環境因素的影響，可能發生多種物理或化學變化，例如聚合、氧化和降解等現象，從而大大喪失活性。因此我們選擇了適合的劑型、輔料、生產工藝，通過控制關鍵的工藝條件，使制的的產品保持了很高的活性和穩定性。中試研究表明，產品制造工藝穩定，操作簡單，周期短，成本低，適合產業化生產。

發明內容

本發明的目的是為了提供一種能穩定保存血小板生成素擬肽蛋白，并適合于實際臨床使用的含有重組血小板生成素擬肽的凍干紛針。

????為達到發明目的，本發明采用的技術方案是：

????一種含有血小板生成素擬肽的凍干粉針，所述凍干粉針由血小板生成素擬肽與藥用級穩定性輔料溶于pH5～6的緩沖液中得到，所述血小板生成素擬肽蛋白濃度為0.1～1mg/mL。

?????血小板生成素擬肽原液由我公司制備，其制備方法在我公司申請的專利申請號為201110235281.5中已有詳細記載，在此不再獒述。所述穩定性輔料可根據需要適當添加。本發明中優選穩定性輔料為甘露醇、甘氨酸和吐溫80，優選甘露醇質量濃度為2-8%，更優選甘露醇質量濃度為5%。優選甘氨酸質量濃度為l-5％，更優選甘氨酸質量濃度為2.5％。優選吐溫80體積濃度為0.001%-0.01%，更優選溫80體積濃度為0.005%。

????所述血小板生成素擬肽的蛋白濃度為0.1～1mg/mL。

????所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、或檸檬酸緩沖液、或醋酸一醋酸鈉緩沖液。所述緩沖液優選為醋酸一醋酸鈉緩沖液，濃度為5～50mmol/L。