[發(fā)明專利]一種聾病易感基因SLC26A4 IVS7-2A>G熒光檢測試劑盒及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210033126.X
• 申請日: 2012-02-14
• 公開（公告）號: CN102559910A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬戈江;魏宏泉;步訊;夏子芳
• 申請（專利權(quán)）人: 北京科聆金儀生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京匯信合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種聾病易感基因SLC26A4?IVS7-2A＞G熒光檢測試劑盒，其特征在于包括DNA聚合酶及其緩沖溶液、擴(kuò)增IVS7-2A＞G及Amelogenin基因座的引物、及基因突變位點(diǎn)IVS7-2A＞G和Amelogenin基因座的基因分型標(biāo)準(zhǔn)物和內(nèi)標(biāo)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于突變熱點(diǎn)IVS7-2A＞G檢測的引物為：SEQ?ID?NO.01和SEQ?ID?NO.02.X；

SEQ?NO.01：5’-CCAGCATTGTAATTTTTTTCCAGG-3’

SEQ?NO.02.1：5’-GTTTTAACATCTTTTGTTTTATTTAG-3’

SEQ?NO.02.2：5’-GTTTTTAACATCTTTGTTTTATTTAG-3’

SEQ?NO.02.3：5’-GTTTTTAACATCTTTTGTTTTATTTG-3’

其中LNA核苷以黑體字表示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所述Amelogenin基因座檢測的引物為：

SEQ?NO.03：5’-CCCTGGGCTCTGTAAAGAAT-3’

SEQ?NO.04：5’-GCAGAGCTTAAACTGGGAAGC-3’。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述的用于IVS7-2A＞G和Amelogenin擴(kuò)增的引物，每對引物中有一條引物的5’端進(jìn)行熒光染料標(biāo)記。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述突變熱點(diǎn)IVS7-2A＞G檢測的引物和用于Amelogenin基因座擴(kuò)增的引物可以采用相同或不同的熒光染料標(biāo)記；內(nèi)標(biāo)選用不同于上述的熒光染料標(biāo)記。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述IVS7-2A＞G和Amelogenin基因座的復(fù)合擴(kuò)增采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來實(shí)現(xiàn)，采用多道或單道毛細(xì)管電泳進(jìn)行檢測。

7.一種快速檢測聾病易感基因SLC26A4突變熱點(diǎn)IVS7-2A＞G的方法，其特征在于通過熒光引物PCR及毛細(xì)管電泳特異性檢測聾病易感基因SLC26A4突變熱點(diǎn)IVS7-2A＞G及Amelogenin基因座；用于SLC26A4基因IVS7-2位點(diǎn)A＞G突變檢測的引物為：SEQ?NO.01和SEQ?NO.02.X所示；用于Amelogenin基因座檢測的引物如SEQ?NO.03、SEQ?NO.04所示；所述IVS7-2A＞G和Amelogenin基因座的復(fù)合擴(kuò)增采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)來實(shí)現(xiàn)，采用多道或單道毛細(xì)管電泳進(jìn)行檢測。