[發(fā)明專利]一種比伐盧定的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210030956.7
• 申請(qǐng)日: 2012-02-13
• 公開（公告）號(hào): CN102532274A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文永均;祝傳斌;王曉莉;韓玉;童光彬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都圣諾生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): C07K7/08
• 分類號(hào): C07K7/08;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所 51124
• 代理人: 武森濤

1.一種比伐盧定的制備方法，包括固相多肽合成法制備比伐盧定樹脂、比伐盧定樹脂酸解得到比伐盧定粗品、比伐盧定粗品純化得到比伐盧定純品，其中固相多肽合成法制備比伐盧定樹脂的方法為：在Fmoc-Leu-載體樹脂上通過(guò)固相偶聯(lián)合成法依次接入下列序列中相對(duì)應(yīng)的保護(hù)氨基酸或片段，得到比伐盧定樹脂：

R₁-D-Phe-Pro-X-Y-Phe-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ile-

Pro-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Leu-樹脂

其中，

R₁為Fmoc或Boc或H；

X為Arg(Pbf)-Pro；

Y為Gly-Gly-Gly-Gly-Asn(R₂)-Gly-Asp(OtBu)，R₂為Trt或H。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：接入X片段時(shí)，

1)用1次偶聯(lián)直接接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-OH；或

2)用2次偶聯(lián)依次接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：第一次為Fmoc-Pro-OH，第二次為Fmoc-Arg(Pbf)-OH。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：接入Y片段時(shí)，

1)分2次偶聯(lián)依次接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：第一次為Fmoc-Asn(R₂)-Gly-Asp(OtBu)-OH，第二次為Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH；或

2)分3次偶聯(lián)依次接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：第一次為Fmoc-Asp(OtBu)-OH、第二次為Fmoc-Asn(R₂)-Gly-0H、第三次為Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH；或

3)分3次偶聯(lián)依次接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：第一次為Fmoc-Gly-Asp(OtBu)-OH、第二次為Fmoc-Asn(R₂)-OH、第三次為Fmoc-Gly-Gly-Gly-Gly-OH；或

4)分3次偶聯(lián)依次接入，F(xiàn)moc-保護(hù)氨基酸或片段為：第一次為Fmoc-Asp(OtBu)-OH、第二次為Fmoc-Gly-Asn(R₂)-Gly-OH，第三次為Fmoc-Gly-Gly-Gly-OH。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：接入X和Y以外的其它的保護(hù)氨基酸分別為：

Fmoc-D-Phe-OH或Boc-D-Phe-OH；Fmoc-Pro-OH；Fmoc-Phe-OH；Fmoc-Glu(OtBu)-OH；Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：接入各個(gè)氨基酸片段時(shí)，保護(hù)氨基酸的用量為載體樹脂總摩爾數(shù)的1.2～6倍，優(yōu)選3倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述Fmoc-Leu-載體樹脂是將載體樹脂與Fmoc-Leu-OH偶聯(lián)得到；所述Fmoc-Leu-載體樹脂的Fmoc-Leu取代值為0.3～1.5mmol/g樹脂，優(yōu)選的Fmoc-Leu-取代值為0.5～1.2mmol/g樹脂。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述載體樹脂為Trityl-Cl類型樹脂或羥基類型樹脂，其中Trityl-Cl類型樹脂優(yōu)選為Trityl-Cl樹脂、4-Methyltrityl-Cl樹脂、4-Methoxytrityl-Cl樹脂或2-Cl?Trity-Cl樹脂；羥基類型樹脂優(yōu)選為Wang樹脂或?qū)αu甲基苯氧甲基聚苯乙烯(HMP)樹脂。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：當(dāng)載體樹脂為三苯甲基氯樹脂時(shí)，F(xiàn)moc-Leu-OH與載體樹脂的偶聯(lián)方法為：Fmoc-Leu-OH的羧基與樹脂中的Cl-代烷在堿作用下發(fā)生酯化反應(yīng)而接入保護(hù)氨基酸；當(dāng)載體樹脂為羥基類型樹脂時(shí)，F(xiàn)moc-Leu-OH與載體樹脂的偶聯(lián)方法為：Fmoc-Leu-OH的羧基與樹脂中的羥基在偶聯(lián)劑、活化劑和堿催化劑的作用下發(fā)生酯化反應(yīng)而接入保護(hù)氨基酸。