[發(fā)明專利]JAK2 V617F突變的檢測(cè)應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210030473.7
• 申請(qǐng)日: 2012-02-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103243153A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 關(guān)明;吳之源;張心菊;劉維薇;陳宇明;張偉;萬(wàn)峻;于波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

1.檢測(cè)JAK2基因的V617F突變的方法，其包括：

(1)對(duì)待檢測(cè)樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中使用的引物對(duì)序列為：

5’-TGAAGCAGCAAGTATGATGAG-3’，

5’-GGGAGTATGTGTCTGTGGAGACTGACACCTAGCTGTGATCCTG-3’；和

(2)用熔解分析儀進(jìn)行熔解分析。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中待檢測(cè)樣品是來(lái)自不同個(gè)體的混合樣品。

3.權(quán)利要求2所述的方法，其中混合樣品中V617F突變型的JAK2基因含量不超過(guò)20％。

4.權(quán)利要求1所述的方法，其中PCR擴(kuò)增的體系還包括SYTO-9熒光染料。

5.權(quán)利要求1所述的方法，其中熔解分析是生成熒光-熔解溫度導(dǎo)數(shù)曲線。

6.權(quán)利要求1所述的方法，其中PCR擴(kuò)增的步驟為：預(yù)變性95℃2min，70次熱循環(huán)，其中每次循環(huán)為95℃1秒，55℃1秒，72℃1秒。

7.引物對(duì)，其序列為：

5’-TGAAGCAGCAAGTATGATGAG-3’，

5’-GGGAGTATGTGTCTGTGGAGACTGACACCTAGCTGTGATCCTG-3’。

8.用于檢測(cè)JAK2基因的V617F突變的試劑盒，其包括權(quán)利要求7所述的引物對(duì)。

9.權(quán)利要求8所述的試劑盒，其還包括SYTO-9熒光染料。

10.權(quán)利要求7所述的引物對(duì)和/或權(quán)利要求8或9所述的試劑盒在制備用于權(quán)利要求1～6之任一所述的方法的測(cè)試制品中的應(yīng)用。