[發(fā)明專利]一種用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品中糖化血紅蛋白HbAlc的多通道毛細(xì)管電泳檢測(cè)方法

無(wú)效

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• 申請(qǐng)日: 2012-02-10
• 公開（公告）號(hào): CN102539512A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 寧小檬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海康盈生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N27/447
• 分類號(hào): G01N27/447
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

技術(shù)領(lǐng)域

本項(xiàng)發(fā)明涉及一種用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品中糖化血紅蛋白HbAlc的多通道毛細(xì)管電泳檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

目前對(duì)糖化血紅蛋白的檢測(cè)一直都存在檢測(cè)通量低，成本高或者準(zhǔn)確度低的情況。

例如免疫法的準(zhǔn)確度較差，成本也比較高；離子交換色譜方法準(zhǔn)確度很高，但是沒有辦法實(shí)現(xiàn)高通量測(cè)試，而且實(shí)驗(yàn)成本也很高，普通病人難以接受。本發(fā)明旨在建立一套高通量，高速度，能夠同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品的陣列毛細(xì)管電泳方法，以滿足糖化血紅蛋白檢測(cè)的要求。

多通道毛細(xì)管電泳技術(shù)已經(jīng)成功應(yīng)用于DNA測(cè)序系統(tǒng)，但是將多通道毛細(xì)管電泳系統(tǒng)用于糖化血紅蛋白HbAlc指標(biāo)檢測(cè)在國(guó)內(nèi)尚無(wú)報(bào)道；目前國(guó)內(nèi)，已有將單根毛細(xì)管電泳方法用于糖化血紅蛋白HbAlc檢測(cè)的報(bào)道，但此方法通量過(guò)低，無(wú)法滿足大量樣本檢測(cè)的要求。本方法將科研工作中使用的多通道毛細(xì)管電泳技術(shù)與單道毛細(xì)管電泳糖化血紅蛋白檢測(cè)技術(shù)結(jié)合在一起，既解決了糖化血紅蛋白HbAlc檢測(cè)的難題，又大大提高了檢測(cè)的通量與速度，滿足了檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明用于糖化血紅蛋白HbAlc相對(duì)含量測(cè)定高通量及快速測(cè)定。本發(fā)明使用多根毛細(xì)管的陣列作為分離通道可以同時(shí)對(duì)多個(gè)血液樣品中的糖化血紅蛋白HbAlc進(jìn)行分析和檢測(cè)，并自動(dòng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，生成報(bào)告。

本發(fā)明提供一種用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品中糖化血紅蛋白HbAlc的多通道毛細(xì)管電泳檢測(cè)方法，使用陣列毛細(xì)管和光陣列檢測(cè)裝置同時(shí)對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行糖化血紅蛋白HbAlc檢測(cè)。

優(yōu)選的，所述檢測(cè)方法包括以下步驟：

1)將分離緩沖液充入陣列毛細(xì)管中的各毛細(xì)管中作為分離環(huán)境；

2)將各樣品同時(shí)加入到陣列毛細(xì)管中的各毛細(xì)管的前端；

3)當(dāng)樣品進(jìn)入毛細(xì)管陣列中的各毛細(xì)管前端后，將陣列毛細(xì)管的兩端更換為分離緩沖液；

4)在毛細(xì)管兩端施加電壓作為分離驅(qū)動(dòng)力；

5)通過(guò)檢測(cè)光源和光陣列檢測(cè)器對(duì)毛細(xì)管中的樣品進(jìn)行糖化血紅蛋白HbAlc檢測(cè)；

6)根據(jù)步驟5)所得檢測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算得出各樣品中的糖化血紅蛋白HbAlc的含量。

更優(yōu)選的，所述毛細(xì)管陣列中毛細(xì)管內(nèi)徑20-100微米，有效分離長(zhǎng)度10-50厘米。

更優(yōu)選的，所述毛細(xì)管陣列中毛細(xì)管的數(shù)量為4-48根，所述毛細(xì)管為無(wú)涂層石英毛細(xì)管或內(nèi)壁有涂層的中性石英毛細(xì)管。

更優(yōu)選的，所述毛細(xì)管每根的內(nèi)徑和長(zhǎng)度均保持一致。

進(jìn)一步的，所述4-48根毛細(xì)管構(gòu)成毛細(xì)管陣列作為分離通道，可以對(duì)4-48個(gè)樣品同時(shí)進(jìn)樣進(jìn)行電泳分離和檢測(cè)。

更優(yōu)選的，所述各毛細(xì)管的前部互相平行，末端集合到一處。

更優(yōu)選的，在步驟1)前，在構(gòu)成所述陣列毛細(xì)管的毛細(xì)管內(nèi)壁制備涂層。

更優(yōu)選的，所述涂層為聚陽(yáng)離子涂層和聚陰離子涂層所構(gòu)成的雙層涂層。

更優(yōu)選的，制備所述雙層涂層的方法為：先用聚陽(yáng)離子溶液沖洗毛細(xì)管，再用聚陰離子溶液沖洗毛細(xì)管。

更優(yōu)選的，在制備涂層前，使用強(qiáng)酸和/或強(qiáng)堿溶液對(duì)陣列毛細(xì)管中的毛細(xì)管進(jìn)行處理。

更優(yōu)選的，所述強(qiáng)酸和/或強(qiáng)堿溶液對(duì)陣列毛細(xì)管中的毛細(xì)管進(jìn)行處理、聚陽(yáng)離子和聚陰離子溶液沖洗毛細(xì)管、分離緩沖液充入毛細(xì)管的過(guò)程均通過(guò)壓力完成，所述強(qiáng)酸和強(qiáng)堿溶液、聚陽(yáng)離子和聚陰離子溶液、分離緩沖液均從毛細(xì)管陣列的末端進(jìn)入，從前端排出到廢液池。

更優(yōu)選的，所述強(qiáng)酸溶液選自鹽酸緩沖液或硝酸緩沖液，所述強(qiáng)酸溶液的濃度為0.01-1mol/L。

更優(yōu)選的，所述強(qiáng)堿溶液選自氫氧化鈉水溶液或氫氧化鋰水溶液，所述強(qiáng)堿溶液的濃度為0.01-1mol/L。

更優(yōu)選的，所述聚陽(yáng)離子溶液為含有聚陽(yáng)離子的水溶液，選自聚凝胺水溶液、聚二烯丙基二甲基氯化銨水溶液、白蛋白水溶液，其濃度為0.001-1wt％。

更優(yōu)選的，所述聚陰離子溶液為含有聚陰離子的水溶液，選自聚丙烯酸水溶液、聚苯乙烯磺酸鈉水溶液、硫酸軟骨素水溶液，其濃度為0.001-1wt％。