[發明專利]高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法

無效

• 申請號: 201210029189.8
• 申請日: 2012-02-10
• 公開（公告）號: CN103245717A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 鐘鴻英;黃璐璐;肖瀟;鄭石
• 申請（專利權）人: 華中師范大學
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 張安國;伍見

1.一種高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，該方法將有機小分子基質在高壓下壓制成薄膜，再將薄膜粘在質譜儀的樣品靶上，樣品點在薄膜上并自然風干，將樣品原位洗滌除去無機鹽，自然風干后放入質譜儀進行分析。

2.根據權利要求1所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，所述的有機小分子基質包括：α-氰基-4-羥基肉桂酸或2，5二羥基苯甲酸。

3.根據權利要求1所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，所述的有機小分子基質在高壓下壓制成薄膜，是將有機小分子基質單獨壓制成薄膜，或者與固體樣品混合后壓制成薄膜。

4.根據權利要求3所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，基質單獨壓制成薄膜的方法步驟包括：

1)、稱取基質α-氰基-4-羥基肉桂酸或2，5二羥基苯甲酸，基質的種類和量根據不同的樣品而定；

2)、將步驟1)得到的基質用瑪瑙研缽磨細，使其顆粒大小小于2μm；

3)、將步驟2)得到的基質粉末放入壓片機的模具，模具面積50×70mm，再放入壓片機，施加4800kg壓力，并在此壓力下保持1分鐘；

4)、將步驟3)壓制的基質薄膜取出，保存在室溫即可。

5.根據權利要求3所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，基質與固體樣品混合后壓制成薄膜的方法步驟包括：

1)、稱取基質α-氰基-4-羥基肉桂酸或2，5二羥基苯甲酸，基質的種類和量據不同的樣品而定；稱取固體樣品；

2)、將步驟1)得到的基質和固體樣品用瑪瑙研缽磨細，使其顆粒大小小于2μm；

3)、將步驟2)得到的基質和固體樣品粉末，按基質與固體樣品摩爾比為300∶1比例混合，放入壓片機的模具，模具面積50×70mm，再放入壓片機，施加4800kg壓力，并在此壓力下保持1分鐘；

4)、將步驟3)壓制的薄膜取出，所得薄膜可直接進行激光解析離解質譜分析。?

6.根據權利要求1所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法，其特征在于，所述的樣品原位洗滌除去無機鹽的方法是，使用移液器將10μl或更多1％三氟乙酸水溶液將樣品點完全覆蓋，保持2秒鐘，再用無塵紙吸取樣品上的水，樣品中所含的無機鹽被除去，重復洗2-3次。

7.權利要求1所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法分析蛋白質樣品，其特征在于：取一定量蛋白的酶解液，將樣品調至酸性，pH1-2，使用移液器將1μl樣品點在樣品靶，等待其自然風干后，使用移液器將10μl或更多濃度0.1wt％三氟乙酸水溶液將樣品點完全覆蓋，保持2秒鐘，再用無塵紙吸取樣品上的水，樣品中所含的無機鹽被除去，重復洗2-3次，自然風干后放入質譜儀進行分析；所述的蛋白質為α酪蛋白。

8.權利要求1所述的高壓成型基質薄膜輔助-激光解析離解質譜定量分析方法分析固體樣品，其特征在于：將固體樣品與基質按照摩爾比為1∶300的比例混合并按照權利要求5所述的方法制備成薄膜，所得薄膜可直接進行激光解析離解質譜分析；所述的固體樣品為α酪蛋白酶解液的冷凍干燥干粉。?