[發明專利]狼毒大戟有效成分提取方法及由該成分制備的二萜類藥物

無效

• 申請號: 201210022784.9
• 申請日: 2012-02-02
• 公開（公告）號: CN102603765A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 劉吉成;王曉麗;崔紅霞;牛英才;李曉明
• 申請（專利權）人: 齊齊哈爾醫學院
• 主分類號: C07D493/20
• 分類號: C07D493/20;C07D493/10;A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 齊齊哈爾鶴城專利事務所 23207
• 代理人: 葉仲剛

技術領域

本發明涉及一種狼毒大戟有效成分提取方法，本發明還涉及一種由該有效成分制備的二萜類藥物，該藥物主要用于乳腺腫瘤的治療。

背景技術

惡性腫瘤是嚴重危害人類生命健康的常見病和多發病，也是危害人類生命健康的重要殺手，目前約有90%的惡性腫瘤患者死于腫瘤轉移，控制轉移是決定惡性腫瘤患者預后的關鍵因素。臨床治療惡性腫瘤主要是采用手術切除、放射性治療和化學藥物治療等方法，但這些療法對腫瘤的轉移行為控制效果不佳，大約30%新診斷的實體瘤患者已有臨床可見的轉移灶，而目前發現的抗腫瘤轉移劑如維甲酰胺、紫杉醇、阿拉伯半乳糖和肝素等均由化學合成方法得到，毒性比較大，效果不明顯。因此，迫切需要一種療效顯著而毒副作用低的抗腫瘤轉移天然藥物。

中藥狼毒大戟（Euphorbia?fischeriana?Steud.）為大戟科植物狼毒大戟的干燥根，多年生草本；高達40cm，有白色乳液；根肥厚肉質，圓柱形，外皮土褐色，含黃色汁液。分布于黑龍江、吉林、遼寧、內蒙古、等省區。春、秋季采挖，除去殘莖，洗凈泥土，曬干切片。全株有毒，根毒性大?？赏庥弥晤^癬，殺鼠。全草含刺激性乳汁，皮膚接觸后，能引起水泡，誤食引起口腔咽喉的刺激、惡心、嘔吐、出血性下痢、腹痛、出冷汗、面色蒼白、血壓下降、煩躁，嚴重時精神失常，眩暈、站立不穩、抽搐、痙攣，有時引起死亡。狼毒大戟得到的有毒成分為12-異丁?；?13-乙?；?20-當歸?；鸩ù减?12-isobutyryl-13-acetyl-20-angelyphorbol)，毒性不強，小鼠耳殼試驗半數有效量為2.5μg/ear，持續時間也較短。此外，尚含O-乙?；?N-?(N′-苯酰-L-苯丙氨酰)-L-苯丙氨醇(O-acetyl-N-(N′-benzoyl-?L-phenylalanyl)-L-phenylalaninol)及樹脂等成分。

?研究表明，大戟科植物(特別是狼毒大戟)具有抗癌癥作用，參見專利CN1500504；王莉平，王義善，張國營等.?狼毒對惡性黑色素瘤細胞生長的影響及其分子作用機制的研究[J]，時珍國醫國藥，2011，22(5):?1133-1135。這些試驗選用狼毒大戟藥粉或粗提取物進行觀察，對其有效部位并未詳細闡述。

?專利CN1500504采用了傳統水煎煮提取狼毒大戟有效成份。潘勤等采用了乙醇回流提取狼毒大戟有效成份，參見潘勤，施敏鋒，閔知大，狼毒大戟中4種Jolkinolide型二萜的二維核磁共振研究，中國藥科大學學報，2004年第35卷第1期第16-19頁。這些方法二萜類成份提取率低，難以提高治療效果。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于提供一種狼毒大戟有效成分的提取方法，本發明的要解決的另外一個技術問題還在于提供一種由該有效成分制備的二萜類藥物，該方法及所制得的藥物具有高效、安全、成本很低的優點。

?本發明狼毒大戟有效成分的提取方法的技術方案如下：該方法取狼毒大戟的根部，采用超臨界二氧化碳萃取方法、以無水乙醇為夾帶劑進行提取，得到的提取物再以大孔吸附樹脂分離，獲得具有醫用療效的二萜類活性物質。

本發明狼毒大戟有效成分的提取方法的具體步驟包括：

1．超臨界二氧化碳萃取

取狼毒大戟的根部，陰干后粉碎至14-24目，置超臨界二氧化碳萃取釜中萃取，條件為：壓力25-35MPa、溫度40-60℃、以超臨界二氧化碳流量100:5-15v/v的比例加入夾帶劑乙醇。然后進入分離釜分離：40-50℃、5.5-8MPa。按以上條件萃取4h，超臨界二氧化碳流體萃取體積不低于萃取釜體積的8倍，收集分離萃取液。

?2．大孔樹脂分離

萃取液減壓回收乙醇至無餾出液、得到的白色粘稠物。用體積比為75:25的石油醚、乙酸乙酯溶液將該白色粘稠物制成混懸液，以1BV/h的流速流過預處理好的大孔吸附樹脂柱至有色層約1/3柱體積。再用該石油醚、乙酸乙酯溶液以3BV/h流速洗脫3倍柱體積，得到包括jolkinolide?B、17-hydroxyjolkinolide?B和17-hydroxyjolkinolide?A等14個化合物。

3．本發明藥物原料的提取?