[發明專利]一種快速篩檢動物食品樣中抗菌藥物殘留的檢測方法

有效

• 申請號: 201210014205.6
• 申請日: 2012-01-06
• 公開（公告）號: CN102590196B
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發明（設計）人: 杜季梅;劉佳明;孫晶;胡瑜
• 申請（專利權）人: 溫州醫學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速篩檢動物食品樣品中青霉素殘留的檢測方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)菌株活化：將短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)LJM-006菌株，保藏編號為CGMCC No.5418，接種于營養瓊脂斜面培養基上，調節該培養基的pH值至6.8～7.2，于35～37℃下進行優化培養，并進行轉種繼代培養；

(2)菌懸液制備：取步驟(1)所得短雙歧桿菌接種于營養瓊脂斜面培養基，35±2℃厭氧培養24小時，用滅菌生理鹽水將菌苔洗下，制成懸液，調整其OD₆₀₀值至0.25～0.35，置2-8℃冰箱中保存；

(3)檢測管制備：以重量計，取蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸鈉5g，K₂HPO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，MnSO₄·4H₂O 0.2g，低聚果糖3g，檸檬酸二銨2g，吐溫-80 1mL，蒸餾水1L，加熱溶解校正pH值至6.5，115℃高壓滅菌15-20分鐘，冷卻溫度為50～65℃，并迅速取出10mL液體并混合步驟(2)所制備的菌懸液，注入10ml試管內，作為測試待用；

(4)樣品前處理：取待檢的動物食品樣品勻漿組織5g，用無菌1％磷酸鹽緩沖液20mL稀釋，漩渦混勻，于80℃水浴加熱5min，冷卻后于5，000r/min離心15min，取上清液作為供試樣品液；

(5)樣品檢測：參照TTC法，檢驗動物食品中青霉素的殘留量，取步驟(4)所得供試樣品液20～100μL加到步驟(3)所制備檢測管中，密閉封口后于35±2℃厭氧培養8～10小時，加TTC0.3mL，36±1℃水浴培養30min，根據顯色狀態判定試驗結果：檢測樣品呈乳的原色時為陽性，呈紅色為陰性。