[發明專利]人血白蛋白的制備方法

無效

• 申請號: 201210013227.0
• 申請日: 2012-01-16
• 公開（公告）號: CN102532304A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 田健生;徐健生;王玉兵
• 申請（專利權）人: 武漢中原瑞德生物制品有限責任公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種人血白蛋白的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

第一步，分離組分I+II+III：以人血漿為原料，加壓過濾分離人血漿，分離組分I+II+III沉淀，收集壓濾上清液進入下一步工序；

第二步，分離組分IV：將上一步收集的壓濾上清液，采用加壓過濾分離組分IV沉淀，收集壓濾上清液進入下一步工序；

第三步：分離組分V：將上一步收集的壓濾上清液，采用加壓過濾分離組分V，收集壓濾分離組分V沉淀進入下一步工序；

第四步：精制純化，將上一工序收集的組分V沉淀的pH調節至4.5～4.6，調控溫度至-2～-3℃，靜置4小時以上，深層過濾，收集過濾液進入下一工序；

第五步，超濾：將上一工序深層過濾液的pH調節至4.0～4.5，再濃縮深層過濾液至蛋白質含量22％以上，收集超濃縮液進入下一步工序；

第六步，巴氏滅活：將上一步超濾濃縮液調pH?6.8～7.0，添加辛酸鈉，至每克蛋白質中添加0.14～0.18克辛酸鈉，60±0.5℃水浴保溫10小時。

第七步，除菌灌裝，檢定成品，將檢定合格后產品貼簽、裝盒等進行包裝。

2.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第一步中分離組分I+II+III具體步驟是，將低溫冰凍人血漿融化為液體狀態，加入體積份數為95％的-15℃的藥用乙醇，至最終乙醇的體積達到人血漿和藥用乙醇混合液總體積的20％，同時用pH為4.0的緩沖液調節人血漿和藥用乙醇混合液的pH至6.2～6.4，并調節血漿蛋白質使其質量分數達到5.0％，調控溫度至-5℃，攪拌2小時以上，靜置4小時以上后，往混合液中按20g/L加入硅藻土或珍珠巖或二者組合作為助濾劑，采用加壓過濾分離方法分離組分I+II+III沉淀。

3.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第二步中分離組分IV的具體步驟是，將第一步收集的壓濾上清液，用pH為4.0的緩沖液調節pH至6.0～6.2，加入體積份數為95％的-15℃藥用乙醇至乙醇的體積達到第一步收集的壓濾上清液和藥用乙醇混合液總體積的40％，調控溫度至-5℃，攪拌2小時以上，靜置6小時以上，往混合液中按15g/L加入硅藻土或珍珠巖或二者組合作為助濾劑，采用加壓過濾分離方法分離組分IV沉淀。

4.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第三步中分離組分V的具體步驟是，將第二步收集的壓濾上清液，用1～2mol/L醋酸溶液調節pH至4.7～4.9，加入體積份數為95％的-15℃藥用乙醇至上一步收集的壓濾上清液和藥用乙醇混合液總體積的40％，調控溫度至-8℃，攪拌2小時以上，靜置8小時以上，采用加壓過濾分離方法分離組分V沉淀。

5.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第四步中，采用1mol/L醋酸溶液調節組分V沉淀的pH調節至4.5～4.6。

6.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第五步中超濾的具體步驟是，將第四步得到的深層過濾液用1mol/L醋酸溶液調節pH至4.0～4.5，濃縮使制品溶液的蛋白質的質量分數為8～10％的濃縮液，往制品溶液中添加質量分數為10～30％的氯化鈉溶液，至氯化鈉溶液的體積達到制品溶液和氯化鈉混合液總體積的1.0～1.5％，用體積為5倍濃縮液體積且質量份數為0.9％的氯化鈉溶液透析，接著用體積為1倍濃縮液體積且質量份數為0.5％的氯化鈉溶液透析，至乙醇體積含量≤0.25％，再濃縮制品溶液至蛋白質含量≥22％。

7.根據權利要求1所述的人血白蛋白的制備方法，其特征在于：第七步中除菌灌裝的具體步驟是，用裝配有0.2微米濾膜的除菌濾器將第六步中巴氏滅活后的蛋白溶液進行除菌過濾，采用機器自動化灌裝至每瓶50ml。