[發明專利]一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法

無效

• 申請號: 201210012078.6
• 申請日: 2012-01-14
• 公開（公告）號: CN102533719A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 黃純純;陳建軍;張巧央;柴央央;蔣王輝;葛永達
• 申請（專利權）人: 臺州職業技術學院
• 主分類號: C12N13/00
• 分類號: C12N13/00;C12N15/01;C12R1/07
• 代理公司: 臺州市方圓專利事務所 33107
• 代理人: 蔡正保;張智平

1.一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

A、活化：將納豆芽孢桿菌菌種接種到斜面培養基上進行活化培養，從斜面上刮取活化后的納豆芽孢桿菌，用無菌生理鹽水配制成菌懸液；

B、復合誘變：取上述菌懸液與8-Mop混合制成含8-Mop的菌懸液，振搖，放入無菌平皿內，進行長波紫外線輻照，然后將上述經過長波紫外線輻照后的含8-Mop的菌懸液稀釋后，涂布于平板培養基上進行培養，生長成熟后，挑選正常型單菌落接種到斜面培養基進行培養，在培養溫度為25℃～35℃的條件下培養40～60小時，得到誘變后的納豆芽孢桿菌菌體；

C、種子培養：將上述步驟B中的誘變后的納豆芽孢桿菌菌體接種到液體種子培養基進行搖床培養，培養溫度為25℃～35℃，培養時間為24～48小時，培養結束后得到種子液；

D、發酵培養：將上述步驟C中得到的種子液接種到液體發酵培養基中進行搖床培養，培養溫度為28～35℃，培養時間為36～60小時，培養結束后得到發酵液；

E、提取、篩選：將上述的發酵液進行離心分離，提取上清液，對上清液進行檢測分析，篩選得到高抗菌性能的納豆芽孢桿菌。

2.根據權利要求1所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟A中所述的菌懸液的濃度為10⁷～10⁸個細胞/mL。

3.根據權利要求1所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟B中所述的含8-Mop的菌懸液中8-Mop的質量濃度為1.0％～7.0％。

4.根據權利要求3所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟B中所述的含8-Mop的菌懸液中8-Mop的質量濃度為3.0％～5.0％。

5.根據權利要求1所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟B中所述的長波紫外線輻照的時間為5s～125s。

6.根據權利要求5所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：所述的長波紫外線輻照的時間為45s～85s。

7.根據權利要求1-6中任意一項所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟B中所述的挑選正常型單菌落接種到斜面培養基進行培養，所述的培養溫度為28℃～30℃的條件下培養45～48小時。

8.根據權利要求1-6中任意一項所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟C中所述的培養溫度為28℃～30℃，培養時間為30～40小時。

9.根據權利要求1-6中任意一項所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟D中所述的液體發酵培養基中含有以下組成的質量含量：胰蛋白胨：1～5g/L；酵母膏：1～20g/L；玉米漿：1～10g/L；葡萄糖：5～15g/L；甘油5～30g/L；可溶性淀粉：5～20g/L；CaCO₃：5～8g/L；NaCl：2～5g/L；pH值為7.0～7.4；其余為蒸餾水。

10.根據權利要求9所述的一種提高納豆芽孢桿菌抗菌性能的方法，其特征在于：步驟D中所述的液體發酵培養基中含有以下組成的質量含量：胰蛋白胨：3～4g/L；酵母膏：4～10g/L；玉米漿：3～6g/L；葡萄糖：8～12g/L；甘油10～15g/L；可溶性淀粉：10～15g/L；CaCO₃：6～7g/L；NaCl：3～4g/L；pH值為7.0～7.4；其余為蒸餾水。