[發明專利]一種檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的方法有效
| 申請號： | 201210011338.8 | 申請日： | 2012-01-13 |
| 公開（公告）號： | CN102534006A | 公開（公告）日： | 2012-07-04 |
| 發明（設計）人： | 胡曉湘;田明;李寧 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飛;王加嶺 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 烏骨雞 纖維 黑色素 基因 方法 | ||
1.一種檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的方法，其特征在于，對烏骨雞第20號染色體位于10739109bp位點的核苷酸進行單核苷酸多態性檢測，根據檢測結果判定烏骨雞的纖維黑色素基因為純合或雜合。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，單核苷酸多態性檢測所采用的方法為焦磷酸測序。
3.檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的引物，包括：
F：5′-GCCCCTTCCTGAAGCAATA-3′；和
R：5′-CATGCAGGATCTCTATGAAGAAAA-3′。
4.檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的探針，其核苷酸序列為5′-GTATTCTAGAAGCCATTCC-3′。
5.檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的試劑盒，其含有權利要求3所述的引物及權利要求4所述的探針。
6.一種檢測烏骨雞纖維黑色素基因純合或雜合的方法，其特征在于，以烏骨雞的基因組DNA為模板，采用權利要求3所述的引物進行PCR擴增，然后用權利要求4所述的探針對擴增產物進行單核苷酸多態性檢測，根據檢測結果判定烏骨雞的纖維黑色素基因為純合或雜合；
其中，單核苷酸多態性檢測是針對第20號染色體位于10739109bp位點的核苷酸。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，單核苷酸多態性檢測所采用的方法為焦磷酸測序。
8.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反應體系為：基因組DNA?30ng，1x擴增緩沖液，Mg2+50mM，dNTPs?5mM，引物F?10μM，引物R?10μM，Taq?DNA聚合酶1U，加水補至25μl。
9.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反應條件為：95℃變性5min；95℃變性15sec，57℃退火30sec，72℃延伸30sec，共45循環；72℃延伸7min；20℃保存。
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