[發(fā)明專利]一種疫苗佐劑CCL28及制備方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210009575.0
• 申請日: 2012-01-13
• 公開（公告）號: CN102559693A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設計）人: 胡勤學;胡凱;羅素坤
• 申請（專利權）人: 中國科學院武漢病毒研究所
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/63;C07K14/47;A61K39/39
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術領域

本發(fā)明涉及基因工程、蛋白質工程和免疫學領域，具體地說，本發(fā)明涉及一種疫苗佐劑CCL28，同時還涉及一種疫苗佐劑CCL28的制備方法，還涉及一種疫苗佐劑CCL28的用途。

背景技術

在人類對抗疾病的過程中，疫苗發(fā)揮著至關重要的作用。自從第一個疫苗——天花疫苗的發(fā)明以來，許多曾經致死的疾病都因為相應疫苗的研制成功而得以攻克或使其死亡率大大降低。然后，至今仍然存在許多疾病急待有效疫苗的出現(xiàn)，如艾滋病、流感等，以及一些新生的病毒性疾病，如禽流感、SARS、拉沙熱等(Rappuoli，R.，C.W.Mandl，et?al.(2011).″Vaccines?for?the?twenty-first?century?society.″Nat?Rev?Immunol.)。改良或研制出一個有效的疫苗可以從很多方面著手，其中選用合適佐劑是一種有效且易行的方法。合適的佐劑可以增強抗原的抗原性和免疫原性，從而使機體產生足夠強的免疫力(包括體液免疫、細胞免疫和黏膜免疫等)，抵抗致病病原體的入侵和/或致病。

一個理想的佐劑應具有刺激機體針對抗原產生更強的免疫應答反應，而佐劑本身不具有或具有較弱的抗原性和免疫原性，不對機體產生其它副作用。細胞因子，由于其特殊的性質：一方面，它參與免疫系統(tǒng)的調節(jié)，與機體的免疫能力密切相關，另一方面，由于它是機體自身蛋白，從而本身不具有抗原性和免疫原性，近年來，成為疫苗佐劑研究的熱點對象。IFN-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-15、IL-18和IL-21等都已證明具有較好的佐劑效應(Bolesta，E.，A.Kowalczyk，et?al.(2006).″Increased?level?and?longevity?of?protective?immune?responses?induced?by?DNA?vaccine?expressing?the?HIV-1?Env?glycoprotein?when?combined?with?IL-21?and?IL-15?gene?delivery.″J?Immunol?177(1)：177-191.)(專利號：200510119721.5；200710306039.6；200610147664.6；200510119720.0；200480036307.1)。CC趨化因子配體28(CCL28)，又稱為黏膜相關上皮細胞趨化因子(MEC)，主要表達于氣管、直腸、結腸和陰道等黏膜表皮細胞，以及唾液腺等外分泌性腺體。CCL28通過與其受體CCR3和CCR10的相關互作用而趨化吸引IgA分泌漿細胞至黏膜表面或腺體(Lazarus，N.H.，E.J.Kunkel，et?al.(2003).″A?common?mucosal?chemokine(mucosae-associated?epithelial?chemokine/CCL28)selectively?attracts?IgA?plasmablasts.″Journal?of?Immunology?170(7)：3799-3805；Hieshima，K.，Y?Kawasaki，et?al.(2004).″CC?Chemokine?Ligands?25?and?28Play?Essential?Roles?in?Intestinal?Extravasationof?IgA?Antibody-Secreting?Cells.″J?Immunol?173(6)：3668-3675；Eksteen，B.，A.Miles，et?al.(2006).″Epithelial?inflammation?is?associated?with?CCL28?production?and?the?recruitment?of?regulatory?T?cells?expressing?CCR10.″Journal?of?Immunology?177(1)：593-603；Sundtrom，P.，S.B.Lundin，et?al.(2009).″Human?IgA-secreting?cells?induced?by?intestinal，but?systemic，immunization?respond?to?CCL25(TECK)and?CCL28(MEC)(vol?38，pg3327，2008).″European?Journal?of?Immunology?39(11)：3267-3267.)。Kutzler等在研究流感疫苗時發(fā)現(xiàn)，以質粒形式的CCL28與質粒形式的抗原混合后，通過肌肉注射的方式免疫小鼠，不但能夠提高血清中抗原特異性的IgG、IgA水平，外周IFN-γ水平，而且能夠增強腸相關淋巴組織和肺部的抗體分泌(Kutzler，M.A.，K.A.Kraynyak，et?al.(2009).″Plasmids?encoding?the?mucosal?chemokines?CCL27?and?CCL28?are?effective?adjuvants?in?eliciting?antigen-specific?immunity?in?vivo.″Gene?Ther.)。另外，在HIV-1的研究中，Castelletti等發(fā)現(xiàn)HIV-1感染女性的母乳和唾液中HIV-1特異性抗體濃度與CCL28濃度正相關(Castelletti，E.，S.Lo?Caputo，et?al.(2007).″The?Mucosae-Associated?Epithelial?Chemokine(MEC/CCL28)Modulates?Immunity?in?HIV?Infection.″PLoS?ONE?2(10)：e969.)。