[發明專利]一種賴氨酸連續發酵的方法

有效

• 申請號: 201210009366.6
• 申請日: 2012-01-13
• 公開（公告）號: CN102533889A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 陳修;盧宗梅;吳曉艷;鐘華;邵引剛
• 申請（專利權）人: 中糧生物化學（安徽）股份有限公司
• 主分類號: C12P13/08
• 分類號: C12P13/08;C12R1/13;C12R1/15;C12R1/19
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王浩然;王鳳桐

技術領域

本發明涉及一種賴氨酸發酵的方法，尤其是涉及一種賴氨酸連續發酵的方法。

背景技術

目前我國賴氨酸發酵均采用間歇發酵的方法，發酵采用每罐按照一定的比例投入發酵培養基并接入一定的賴氨酸發酵菌種，在流加碳源和流加氮源的條件下，進行發酵培養。隨著發酵的進行，賴氨酸酸度逐漸提高，總體積增加，營養物質濃度逐漸降低，發酵產酸速率呈下降趨勢。當營養物質降低到一定程度后，發酵產酸速率降低到一定程度即判斷為發酵終點，當發酵結束后進入提取工藝。

隨著發酵的進行，發酵營養物質降低到一定程度，賴氨酸菌種的代謝能力下降，致使發酵產酸速率緩慢而放罐，而放罐后要進行罐的清洗、檢查、滅菌，并要重新裝填培養基，接入賴氨酸菌種重新開始發酵培養，每批次罐的發酵培養的時間較短，無形中增加了輔助周期的數量，導致發酵設備的使用效率降低。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術中發酵設備的使用效率較低的缺陷，提供一種新的賴氨酸發酵的方法。

本發明的發明人驚奇地發現，通過在發酵培養20小時后，向發酵液中流加賴氨酸發酵培養所需的營養物質，能夠使賴氨酸菌種的代謝能力基本不下降，從而能夠使發酵產酸速率基本維持不變，從而無需放罐，使發酵過程得以連續進行。

因此，為了實現上述目的，本發明提供了一種賴氨酸連續發酵的方法，所述方法包括將賴氨酸發酵菌種接入賴氨酸發酵培養基中，在流加碳源和流加氮源的條件下，進行發酵培養，其特征在于，在發酵培養20小時后，向發酵液中流加賴氨酸發酵培養所需的營養物質。

優選地，所述方法還包括在發酵培養20小時后，向發酵液中流加賴氨酸發酵菌種。

本發明提供的賴氨酸連續發酵的方法，大大延長了發酵培養的時間，且不影響轉化率，提高了賴氨酸菌種的代謝能力，在設備不出現故障和發酵培養基不染菌的情況下，發酵可以一直進行下去，提高了單位時間供酸量，并提高了設備利用率，進而降低了賴氨酸發酵成本。

本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。

具體實施方式

以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。

本發明提供了一種賴氨酸連續發酵的方法，所述方法包括將賴氨酸發酵菌種接入賴氨酸發酵培養基中，在流加糖和流加有機氮源的條件下，進行發酵培養，在發酵培養20小時后，向發酵液中流加賴氨酸發酵培養所需的營養物質。

本發明中，發酵培養基為本領域技術人員公知的概念，指微生物發酵所需的供微生物生長和維持用的人工配制的養料，一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。發酵液也為本領域技術人員公知的概念，指接入微生物菌株的液體培養基(該液體培養基也即本發明中所稱發酵培養基)，經過一段時間的培養后所得產物。

本發明中，以接種后且流加碳源和流加氮源之前的發酵培養基為基準，賴氨酸發酵菌種的接種量為12-18體積％。本領域技術人員應該理解的是，賴氨酸發酵菌種在被接種至發酵培養基中之前，采用常規方法將賴氨酸發酵菌種經過種子罐培養，在種子罐培養的培養程度可以通過取樣顯微鏡鏡檢、OD(optical?density)值測定對產賴氨酸微生物的生長進行觀察，當通過上述方法觀察菌體形態正常、測定OD值達到0.75以上時停止培養，將此時種子罐中的種子液稱為成熟種子液，然后再將成熟種子液接入發酵培養基中。因此，本發明中，賴氨酸發酵菌種的接種量為12-18體積％，指的是接入發酵培養基中的成熟種子液的體積占接入成熟種子液后發酵培養基體積的12-18％。

種子罐培養可以采用一級種子罐培養也可以采用二級種子罐培養，一級種子罐培養即將賴氨酸發酵菌種在一個種子罐中一直培養到所需的培養程度；二級種子罐培養即先將賴氨酸發酵菌種在一個種子罐中培養一段時間后再轉入另一個種子罐繼續培養，培養到所需的培養程度。二級種子罐培養在各個種子罐的培養時間沒有具體限定，只要最終能培養到所需的培養程度即可。為了操作方便，本發明的種子罐培養優選采用一級種子罐培養。