[發明專利]鑒定優質抗蟲雜交棉中棉所70品種真實性和／或品種純度的SSR分子標記方法

有效

• 申請號: 201210009203.8
• 申請日: 2012-01-12
• 公開（公告）號: CN102586426A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 袁友祿;石玉真;李俊文;商海紅;劉愛英;龔舉武;張金鳳;葛瑞華;龔萬奎;王濤
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京知本村知識產權代理事務所 11039
• 代理人: 劉江良

技術領域

本發明涉及一種鑒定優質抗蟲雜交棉?“中棉所70”?種子真實性和／或品種純度的SSR標記方法，利用這些特異引物對優質棉花雜交種F₁品種“中棉所70”?的種子進行真偽鑒別和／或品種純度的鑒定，屬于生物技術應用領域。?

背景技術

棉花是我國重要的經濟作物，在我國國民經濟與社會發展中具有重要地位。近年來，抗蟲雜交棉的成功育成與推廣，推動了我國雜交棉生產的快速發展，并成為世界上雜交棉大面積種植的兩個國家之一(邱新平.棉花雜種優勢的研究與利用進展[J].中國棉花，2000,27（10）：4-7?)。2006年，我國雜交棉種植面積占全國棉田總面積的33.2%，長江流域棉區基本實現雜交種化，黃淮海棉區和西北內陸棉區的種植面積逐年擴大。雜交棉生產實踐證明，高質量的種子是雜交棉優勢得以發揮的基礎。種子純度是衡量雜交棉種子質量的主要指標，低純度種子將導致棉花產量和品質的顯著下降。由于在棉花雜交制種過程中，人工去雄不徹底或漏去雄，常會出現假雜交種，導致種子遺傳純度下降，給生產造成巨大的經濟損失，同時，一些不法分子或種子經營單位為追求高額利潤，以劣充好，假冒偽劣種子進入市場并用于生產，造成棉花減產和品質降低，進而影響優良品種的市場銷售信譽及其產業化發展。因此，優良F₁代雜交種種子真實性和／或品種純度的快速、準確（簡便、經濟）鑒定成為棉花生產中最為迫切解決的問題之一。?

目前我國棉種的真實性和／或品種純度鑒定仍主要依靠田間小區種植形態鑒定方法，但形態鑒定受環境影響較大，鑒定工作量大，成本高，耗時長，并受季節限制（匡?猛等，分子標記技術在棉花品種鑒定上的研究進展.棉花學報，2009,21(4):330-334）。隨著棉花品種數量的日益增加和遺傳基礎的日益狹窄，使得完全根據形態性狀進行棉花品種的辨別越來越困難。近年來，分子生物學的發展使品種鑒定進入到基因水平，以DNA為基礎的SSR(?Simple?Sequence?Repeat，簡單序列重復)分子標記技術，屬于共顯性標記,?在基因組中分布平均，具有檢測位點數量多、多態性高、遺傳穩定、不受環境條件影響等優點，已在棉花遺傳連鎖圖譜的構建、?遺傳多樣性研究、?標記和定位基因以及分子標記輔助選擇、品種親緣關系及分類等方面得到應用，并發揮著越來越重要的作用；在棉花的品種鑒定、種子純度檢測方面也進行了一定的研究（匡?猛,楊偉華,許紅霞,王延琴,周大云,馮新愛,王俊芳.分子標記技術在棉花品種鑒定上的研究進展.棉花學報?2009,21(4):330-334；武耀廷,張天真,郭旺珍,等.陸地棉品種SSR標記的多態性及用于雜交種純度檢測的研究[J].棉花學報,2001,13(3):131-133；殷劍美,陳旭升,狄佳春,等.雜交棉蘇雜118的SSR指紋圖譜構建[J].江蘇農業科學,2007(4):29-31；劉勤紅,王芙蓉,張?軍,等.利用SSR標記鑒定魯棉研15號雜交種純度的研究[J].山東農業科學,2003(2):7-16；朱美霞,李英芝,王建書,等.利用SSR方法鑒定棉花品種純度[J].安徽農業科學,2005,33(11):2010-2016；秦?利,李?冰,范?玲,等.新疆陸地棉SSR標記指紋圖譜構建和雜種純度鑒定研究雜種純度鑒定研究[J].新疆農業科學,2005,42(6):399-401），研究結果表明，利用分子標記進行棉花品種純度鑒定是可行的。?

“中棉所?70”是以雙價轉基因(Bt?+?CpTI)抗蟲棉新品系?sGK中?156?為母本，陸地棉常規優質系?901-001?為父本配制成的F₁代雜交種（袁有祿，石玉真，李俊文，劉愛英，翟學軍，李悅有，桑文東.?轉基因抗蟲優質雜交棉-中棉所?70（見中國棉花，2009,36(2):17）。2007年獲農業部轉基因生物安全證書，2008?年經第二屆國家農作物品種審定委員會第二次會議審定通過，是國內首批通過國家審定的優質抗蟲雜交棉。試驗示范結果表明，該品種具有優質、高產、穩產、抗蟲性強、適應性廣、耐枯黃萎病等特點，特別是在黃河流域及長江流域纖維品質均表現突出，HVICC纖維上半部平均長度32.5mm，斷裂比強度33.5cN/tex，馬克隆值4.3，適紡60支以上的高支紗，是生產優質棉及種植業結構調整的理想品種。為保證該優良品種生產最大的經濟效益、產業化的快速發展，需要一種權威、準確、快速穩定的檢測方法對其商品種子的真偽及遺傳純度進行鑒定。?

發明內容