[發明專利]一種快速檢測飼料用非淀粉多糖酶效價的方法

無效

• 申請號: 201210008526.5
• 申請日: 2012-01-12
• 公開（公告）號: CN102590013A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 陸文清;王園;劉緒同;曹云鶴;王春林
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: G01N5/04
• 分類號: G01N5/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種快速檢測飼料用非淀粉多糖酶效價的方法。

背景技術

飼料用非淀粉多糖酶是目前飼料工業中應用最廣的飼料酶，主要包括木聚糖酶、纖維素酶、葡聚糖酶、果膠酶和甘露聚糖酶，它們少部分以單體酶形式使用，大部分以復合酶形式使用。在我國，非淀粉多糖酶占飼料酶市場總量的65％左右。在歐洲和北美，非淀粉多糖酶占飼料酶市場總量的70％左右。

對于非淀粉多糖酶的分析測定，無論是單體酶還是復合酶，都很繁瑣，而且分析數據的實用性和重復性也不理想。目前，實驗室的分析底物都是純度比較高而且容易溶于水的聚合物，但是它們實際的天然底物都是不溶于水的聚合物，而且這些聚合物往往相互交聯在一起，組成成分也比較復雜。非淀粉多糖酶對天然底物的降解效率很差，往往只有可溶性底物的5～10％左右，而且很難準確定量。動物飼養試驗雖然直觀，可靠性也比較好，但是試驗的時間太長(至少需要2個月)，成本也很高，在實際生產過程中很難推廣，對于科研過程中要求的快速分析要求甚遠。

發明內容

本發明的目的是提供一種快速檢測飼料用非淀粉多糖酶效價的方法。

本發明提供的檢測飼料用非淀粉多糖酶效價的方法，包括如下步驟：以本發明提供的不含淀粉的麥麩為底物，將其與待測飼料用非淀粉多糖酶混勻進行酶解反應，反應完畢后測定剩余所述底物的干重，按照如下公式計算得到降解效率，根據所得降解效率評價所述待測非淀粉多糖酶的效價：

該方法所述酶解反應步驟中，酶解溫度選擇飼養動物消化道的溫度。

本發明提供的麥麩制備方法，包括如下步驟：將麥麩原料浸泡、洗凈后，剔除其中完整的麥粒，再與水混勻后進行糊化反應，加入α-淀粉酶進行反應，反應完畢后再與糖化酶進行反應，反應完畢后得到所述不含淀粉的麥麩。

上述方法的所述糊化反應步驟中，溫度為95～100℃，時間為10～15分鐘；

所述加入α-淀粉酶進行反應步驟中，溫度為65～70℃；時間為25～30分鐘；

所述與糖化酶進行反應步驟中，溫度為95～100℃，時間為60分鐘。

所述α-淀粉酶的酶活為4000u/g；所述糖化酶的酶活為80000u/g。

所述制備不含淀粉的麥麩的方法，還包括如下步驟：在所述與糖化酶進行反應完畢后，將產物自然冷卻至室溫后水洗并常溫干燥，得到所述不含淀粉的麥麩。

所述水洗次數為3～4次，所述干燥步驟中，時間為20～24小時。

按照上述方法制備得到的不含淀粉的麥麩，也屬于本發明的保護范圍。所述不含淀粉的麥麩中，淀粉的質量百分含量不超過0.01％，含水量為8.0％。

本發明提供的快速檢驗飼料用非淀粉多糖酶效價的方法，以消除淀粉的麥麩為分析底物，在設定的溫度和溶液中加入需要分析的飼料用非淀粉多糖酶。這種飼料酶可以是單體酶，也可以是復合酶。經過設定的反應時間以后，經過濾洗滌、干燥，測定殘留底物的干重，計算降解效率，以此作為主要指標評價比較所分析酶的效價。這種試驗方法不僅可以快速檢測單酶在實驗室配制緩沖液中的效價，也可以快速檢測復合酶在實驗室配制的緩沖液中的效價。不僅可以快速檢測單酶在動物消化液中的效價，也可以快速檢測復合酶在動物消化液中的效價。該方法直觀、簡便，不需要很精密的分析儀器，而且能同時檢驗動物消化道的環境對酶蛋白作用效果的影響，從而能更客觀全面地反映這些飼料酶的實際效價。飼料生產企業和養殖戶可以參照上述方法對非淀粉多糖酶的效價進行分析和比較，適用于飼料用非淀粉多糖酶的研究、生產和應用，特別適用于畜禽和水產飼料中非淀粉多糖酶效價的快速檢測。

附圖說明

圖1為緩沖液中的麥麩降解效果。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步闡述，但本發明并不限于以下實施例。所述方法如無特別說明均為常規方法。所述原料如無特別說明均能從公開商業途徑而得。

實施例1：