[發明專利]一種羅非魚精子通用激活液及制備方法

無效

• 申請號: 201210007531.4
• 申請日: 2012-01-11
• 公開（公告）號: CN102578007A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 柳凌;鄒桂偉;張濤;梁宏偉;張潔明;李忠;郭峰
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院長江水產研究所
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種羅非魚精子通用激活液，它由以下重量份的原料制成：

激活液滲透壓為87.4～134.2mOsM，pH為8.0～9.0；

一種羅非魚精子通用激活液的制備方法，其步驟是：

A、激活液母液的配制：

(1)每毫升含蔗糖1mmol的母液：根據母液的濃度、體積和蔗糖分子量計算出配制母液的蔗糖重量，稱取蔗糖，將蔗糖放入燒杯中，加入體積為配制母液體積二分之一的蒸餾水，使蔗糖溶解，將溶解后的蔗糖溶液倒入配制母液同樣體積的容量瓶中，用蒸餾水洗滌3次，將洗滌后的蒸餾水也倒入容量瓶，最后用蒸餾水定容至容量瓶刻度處，蔗糖重量計算公式如下：

溶質重量＝母液濃度×溶質分子量÷母液體積；

(2)每毫升含氯化鉀1mmol的母液：根據母液的濃度、體積和氯化鉀分子量計算出配制母液需要的氯化鉀重量，稱取氯化鉀，將氯化鉀放入燒杯中，加入配制母液體積二分之一的蒸餾水，使氯化鉀充分溶解，將溶解后的氯化鉀溶液倒入配制母液同樣體積的容量瓶中，用蒸餾水洗滌3次，將洗滌后的蒸餾水也倒入容量瓶，最后用蒸餾水定容至容量瓶刻度處；

(3)每毫升含氯化鎂0.5mmol的母液：根據母液的濃度、體積和氯化鎂分子量計算出配制母液的氯化鎂重量，稱取氯化鎂，將氯化鎂放入燒杯中，加入體積為配制母液體積二分之一的蒸餾水，使氯化鎂溶解，將溶解后的氯化鎂溶液倒入配制母液同樣體積的容量瓶中，用蒸餾水洗滌3次，將洗滌后的蒸餾水也倒入容量瓶，最后用蒸餾水定容至容量瓶刻度處；

(4)每毫升含碳酸氫鈉0.5mmol的母液：根據母液的濃度、體積和碳酸氫鈉分子量計算出配制母液的碳酸氫鈉重量，稱取碳酸氫鈉，將碳酸氫鈉放入燒杯中，加入體積為配制母液體積二分之一的蒸餾水，使碳酸氫鈉溶解，將溶解后的碳酸氫鈉溶液倒入配制母液同樣體積的容量瓶中，用蒸餾水洗滌3次，將洗滌后的蒸餾水也倒入容量瓶，最后用蒸餾水定容至容量瓶刻度處；

(5)上述母液均放置4℃冰箱保存，備用；

B、精子稀釋液的配制：

(1)用取樣器從各組分母液中量取配制激活液，根據激活液配方中各組分的濃度、各組分母液的濃度、以及所配制的激活液體積，按如下公式計算：

量取體積＝配方濃度×稀釋液體積÷母液濃度；

(2)將上述各組分混合均勻；配制的激活液體積大于100ml，在相應體積的容量瓶中混勻，然后用蒸餾水定容至容量瓶刻度，配制的稀釋液體積小于100ml，在玻璃瓶中混勻，根據配制的稀釋液體積減去已經量取的各組分體積總和，加入的蒸餾水體積；

(3)配制好的稀釋液放置4℃冰箱保存，備用。

2.根據權利要求1所述的一種羅非魚精子通用激活液，其特征在于：

激活液滲透壓為93.6～128.4mOsM，pH為8.1～8.9。

3.根據權利要求1所述的一種羅非魚精子通用激活液，其特征在于：

激活液滲透壓為99.4～122.6mOsM，pH為8.2～8.8。

4.根據權利要求1所述的一種羅非魚精子通用激活液，其特征在于：

激活液滲透壓為105.2～116.8mOsM，pH為8.3～8.7。

5.根據權利要求1所述的一種羅非魚精子通用激活液，其特征在于：

激活液滲透壓為111.0mOsM，pH為8.5。

6.根據權利要求1所述的一種羅非魚精子通用激活液，其特征在于：

激活液滲透壓為121.0mOsM，pH為8.6。