[發明專利]利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法

無效

• 申請號: 201210007175.6
• 申請日: 2012-01-11
• 公開（公告）號: CN102533887A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 王漢領;徐大春;沈青紅;呂志祥;萬紅貴;殷志敏
• 申請（專利權）人: 江蘇阿格羅生物科技有限公司
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;C12R1/19
• 代理公司: 南京天翼專利代理有限責任公司 32112
• 代理人: 蔣家華

1.利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于包括如下步驟：

a)?將大腸桿菌（Escherichia?coli）南師一號CCTCCNo.M209166的原始發酵液利用孔徑為0.001-0.01um的超濾膜進行過濾，得到酶和菌體的截留液；

b)?往酶和菌體的截留液中加入乙胺溶液調節pH至10-11，放置2-3小時使菌體解體釋放出細胞內的γ-谷氨酰轉肽酶，得到酶濃縮液；

c)取步驟b）中得到的酶濃縮液加入到含有?L-谷氨酰胺的水溶液中形成酶反應體系，然后通過往酶反應體系中加入乙胺溶液控制酶反應體系的pH為9-10.5，酶轉化溫度為30-35℃。

2.根據權利要求1所述的利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于所述步驟a）中超濾膜的操作壓力為0.15-0.45MPa，溫度為30-35℃。

3.根據權利要求1所述的利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于所述步驟b）和步驟c）中所使用的乙胺溶液的質量濃度為50-70%。

4.根據權利要求1所述的利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于步驟c）中的酶反應體系中L-谷氨酰胺的濃度為40-50g/L。

5.根據權利要求1所述的利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于步驟c）中的酶反應體系中酶活力為4000-6000?U/L。

6.根據權利要求1所述的利用大腸桿菌產γ-谷氨酰轉肽酶高效合成L-茶氨酸的方法，其特征在于步驟c）中的酶轉化時間為12-14小時。