[發明專利]黏附特異性多肽序列聚己內酯多元醇-磷酸三鈣支架無效
| 申請號: | 201210007080.4 | 申請日: | 2012-01-11 |
| 公開(公告)號: | CN102552980A | 公開(公告)日: | 2012-07-11 |
| 發明(設計)人: | 彭浩;周葉方;吳獻青 | 申請(專利權)人: | 中南大學湘雅三醫院 |
| 主分類號: | A61L27/38 | 分類號: | A61L27/38;A61L27/34 |
| 代理公司: | 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115 | 代理人: | 胡山 |
| 地址: | 410083 *** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 黏附 特異性 多肽 序列 內酯 多元 磷酸 支架 | ||
1.黏附特異性多肽序列聚己內酯多元醇-磷酸三鈣支架,其特征在于,結合不同特定細胞粘附膠原多肽序列(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸?Arg—Gly—Asp?RGD序列、天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸?Asp—Gly—GIu—Ala?DGEA?序列)修飾PCL-TCP支架,將多肽分子以交聯方式固定于PCL-TCP支架表面,交聯比例為比例為?0.2毫克多肽/每平方毫米表面積支架。
2.黏附特異性多肽序列聚己內酯多元醇-磷酸三鈣支架的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
第一步:PCL-TCP支架活化:PCL-TCP支架用10%?(w/w)?1,6-hexanediamine/?isopropanol?(DEA/IPA己二胺/異丙醇)溶液處理,常溫25℃時間30分鐘到90分鐘,完成后用0.3%Tween?20(吐溫20)和去離子水充分洗滌,干燥;
第二步:0.1M多肽(精氨酸-甘氨酸天冬氨酸?Arg—Gly—Asp?RGD序列及天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸?Asp—Gly—GIu—Ala?DGEA?序列),?EDC?(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽),?N-hydroxysuccinimide?(NHS,N-羥基琥珀酰亞胺)分別配制于2-(N-morpholino)-ethanesulfonic?acid?(MES,2-(N-嗎啉)乙磺酸)?緩沖液?(pH?of?5.5)中;
第三步:精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg—Gly—Asp?RGD)序列及天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸?(Asp—Gly—GIu—Ala?DGEA)?序列溶液首先和EDC?溶液以?1:1?摩爾比混合;
第四步:相當于25%EDC摩爾量的NHS?溶液加入到混合液,使得最終溶液中多肽:EDC:NHS摩爾比=4:4:1;
第五步:將已活化的PCL-TCP支架置于多肽、EDC、NHS溶液中,比例為?0.2毫克多肽對每平方毫米表面積支架;常溫下處理時間3小時左右;
第六步:完成后用磷酸緩沖液沖洗,干燥即形成支架。
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