[發明專利]一種葡萄無性系品種的育種方法

無效

• 申請號: 201210005630.9
• 申請日: 2012-01-09
• 公開（公告）號: CN102524055A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 吳月燕;王忠華;崔鵬
• 申請（專利權）人: 浙江萬里學院
• 主分類號: A01H1/06
• 分類號: A01H1/06;A01H1/04
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 代忠炯

技術領域

本發明涉及到果樹育種技術領域，具體指利用現代生物技術(物理誘變)手段獲得葡萄優良無性系品種即一種葡萄無性系品種的育種方法。

背景技術

葡萄為葡萄科、葡萄屬植物，起源于黑海和地中海沿岸，是分布最廣泛、適應性最強的果樹之一，目前全世界已形成數千個品種。在我國，北起黑龍江，南至海南島，各省市均有栽培。目前國內外對葡萄新品種選育的方法主要有雜交育種、芽變選種，隨著現代生物技術的發展，使用組織培養技術、誘變技術、分子標記技術和轉基因技術等新型育種技術培育新品種已經成為可能，但成功報道的例子甚少。

自然界葡萄容易產生芽變，目前栽培中部分優良品種由自然芽變選擇培育成功，但自然芽變概率較低，利用人工誘變可以大大提高葡萄的變異概率，是選育葡萄優良品種的良好途徑，但是利用人工誘變育種葡萄的方法還鮮有報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的狀況，提供一種葡萄無性系品種選育的方法。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種葡萄無性系品種選育的方法，通過人工物理誘變的方式，獲得抗病、早熟、優質的葡萄優良單株，該方法包括育種目標的的確定、育種材料的選取、物理誘變劑量的選擇、苗木的培養、變異單株的篩選、變異性狀的分子鑒別等，具體包括下述步驟：

(1)育種目標的確定：以抗病、早熟、優質為主要育種目標；

(2)育種材料的選取：一般選擇具有良好經濟性狀(如產量等)但在某些性狀(如成熟期、抗病性等需要改良的形狀)需要改良的品種；誘變種子從品種純正、已經進入盛果期、生長健壯、無病蟲害的植株上采集；具體為當葡萄果實完全成熟(浙江省一般在8～10月份)，選擇果穗整齊、果粒發育良好的果實采集種子；種子采集后選擇飽滿的種子，用清水反復沖洗洗凈粘在種子表面的果肉，然后用20％多菌靈1000倍液浸泡15分鐘消毒，再用清水沖洗后在陰涼處晾干；晾干的種子以5份沙子(沙子相對濕度60％左右)、1份種子混合后置于4～5℃的冰箱中貯藏；第二年2～3月將種子進行分組，每300粒為一組，分為6組，其中1組為對照，5組用于輻照處理；

(3)物理誘變劑量的選擇：通過預備試驗，采用100、150、200、250、300Gy(5組用于輻照處理，每組對應一組輻射強度)的⁶⁰Coγ射線分別對應五組要輻照處理的種子進行急性輻射，以無輻射處理為對照，劑量率為10Gy/min；

(4)種子的播種：種子播種于育苗床上；育苗床基質為體積比6∶4的泥炭和谷殼的混合物，基質裝盆前用高壓滅菌鍋進行消毒，育苗基質含有有機質30～45g·kg^-1，堿解氮100～130mg·kg^-1，速效磷80～95mg·kg^-1，速效鉀200～230mg·kg^-1，pH6.0～7.5；苗床底部鋪8～10cm厚的卵石、再鋪4～6cm厚的沙子，上層鋪25～30cm厚育苗基質；將處理和對照的種子均勻播種于苗床上，行株距10×10cm；播種后注意苗床基質相對濕度保持60～70％；

(5)苗木的管理：播種后14～15天發芽，當小苗長至5～6葉時定植于大棚設施中；畦寬2.5m，定植前挖定植溝，定植溝內加疏松且已經消毒的土壤，株距0.5m，大棚內的溫度保持20～25℃，大棚內土壤相對濕度保持60～65％，空氣相對濕度保持65～75％，培育3～6年后植株開花結果；

(6)變異單株的篩選：在苗木生長期間，仔細觀測不同處理的生物學、植物學性狀，選擇與對照(對照組苗木)在抗性、植物學和生物學特性等方面有明顯差異的單株；

(7)變異性狀的分子鑒別：選擇優良單株，采集該優良與對照的幼嫩葉片，利用ISSR或者SSR標記技術進行變異基因分析；

(8)優良單株的區域試驗和推廣：通過生物學、植物學性狀以及結果特性的觀測，結合分子鑒別，獲得優良單株；將該單株進行無性繁殖，選擇不同的區域進行試驗，以明確其適種范圍，并總結適合該單株的一整套栽培措施。

上述步驟(4)中育苗基質優選含有有機質38g·kg^-1，堿解氮110mg·kg^-1，速效磷87mg·kg^-1，速效鉀237mg·kg^-1，pH6.3。

上述步驟(4)中苗床底部優選鋪10cm厚的卵石、再鋪5cm厚的沙子，上層鋪25cm厚育苗基質。

上述步驟(4)中播種后苗床基質相對濕度優選保持60％。