[發明專利]一株產苯乳酸的菌株及該菌發酵法制備苯乳酸的方法

無效

• 申請號: 201210005544.8
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102604858A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 沐萬孟;江波;郁書懷
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/42;C12R1/01
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一株產苯乳酸的片球菌屬乳酸菌，其分類命名為戊糖片球菌(Pediococcus?pentosaceus)?SK25，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO：M?2011360。

2.用權利要求1所述的CCTCC?NO：M?2011360菌株發酵生產苯乳酸的方法，其特征在于以CCTCC?NO：M?2011360作為出發菌種，以添加有苯丙氨酸、或苯丙酮酸的MRS培養基為發酵液，發酵法生物轉化制備苯乳酸；工藝為：

（1）菌種：CCTCC?NO：M?2011360；

（2）培養基，以g/L計：

保藏培養基：葡萄糖?20，酵母膏?5，蛋白胨?10，牛肉膏?10，磷酸氫二鉀?2，無水乙酸鈉?5，檸檬酸二銨?2，硫酸鎂?0.58，硫酸錳?0.25，吐溫-80?1mL/L，pH?6.2-6.4；2%瓊脂粉，以自來水配制；

種子培養基：葡萄糖?20，酵母膏?5，蛋白胨?10，牛肉膏?10，磷酸氫二鉀?2，無水乙酸鈉?5，檸檬酸二銨?2，硫酸鎂?0.58，硫酸錳?0.25，吐溫-80?1mL/L，pH?6.2-6.4，以自來水配制；

發酵培養基：葡萄糖?20，酵母膏?5，蛋白胨?10，牛肉膏?10，磷酸氫二鉀?2，無水乙酸鈉?5，檸檬酸二銨?2，硫酸鎂?0.58，硫酸錳?0.25，吐溫-80?1mL/L，苯丙氨酸或苯丙酮酸1-10?mmol/L，pH?6.2-6.4，以自來水配制；

（3）制備工藝：?

菌種保藏：將CCTCC?NO：M?2011360保藏在保藏培養基上，4℃?保存，兩周轉接一次；或在活化菌種對數期時按照保藏培養基:甘油質量比為1:1將其保藏在-80℃超低溫冰箱中；

種子培養：將CCTCC?NO：M?2011360從保藏培養基接種至種子培養基需活化2代，每次30℃靜止培養12?h，即總共24h；

發酵培養：將種子培養后的種子液按發酵液質量2%接入發酵培養基中，30℃靜止培養36h；

發酵液后處理：通過低溫離心法和0.22μm微濾法除去發酵液中的菌體，即得產品苯乳酸。

3.根據權利要求2所述的發酵生產苯乳酸的方法，其特征在于發酵液中添加苯丙酮酸或苯丙氨酸的最終濃度為5-6mmol/L。