[發(fā)明專利]一種產膽鹽水解酶乳酸菌干粉發(fā)酵劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210005533.X
• 申請日: 2012-01-10
• 公開（公告）號: CN102586137A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設計）人: 劉慧;張紅星;謝遠紅;賈慧;鐘思瓊;熊利霞;高秀芝
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A23C9/127;C12R1/245;C12R1/46;C12R1/01
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1.一種利用菌株KL1?CGMCCNo.1809為干酪乳桿菌菌（Lactobacillus?casei)，菌株KS4?CGMCCNo.1807為乳酸乳球菌乳亞種（Lactococcus?lactis?subsp.lacti)，菌株Tx?CGMCCNo.1810為嗜熱鏈球菌(Streptococcus?thermophilus)三種產膽鹽水解酶乳酸菌制備干粉發(fā)酵劑的方法，其特征在于：將菌株KL1、KS4和Tx分別于接種量2％(V/V)，培養(yǎng)溫度37℃，培養(yǎng)時間12h的條件下進行活化，得到活化菌種；將活化菌種于接種量3％，培養(yǎng)溫度37℃，培養(yǎng)時間12h的條件下分別進行擴大培養(yǎng)，得到擴大培養(yǎng)液；將KL1、KS4和Tx菌株的擴大培養(yǎng)液按3∶1∶2的比例接種于蒙牛純牛奶中，總接種量為4％，并按純牛奶體積5％的量加入新鮮胡蘿卜原汁作為生長因子，利用5L自動發(fā)酵罐進行滅菌和高密度培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度40℃，培養(yǎng)液pH6.5，攪拌轉速50r/min，培養(yǎng)時間6h，得到液體發(fā)酵劑；將液體發(fā)酵劑于4℃、8000r/mmin離心10min，棄掉上清液，收集得到菌泥；按離心前發(fā)酵劑1/10體積的量，取滅菌牛奶作為凍干基質，分裝于600mL的凍干瓶中，將離心收集后的菌泥置于凍干基質中，加入2.5％甘油(V/V)、2.5％谷氨酸鈉(W/V)和2.5％脫脂奶粉(W/V)的凍干保護劑，混合均勻后，得到濃縮發(fā)酵劑；將每個凍干瓶裝量為100mL的濃縮發(fā)酵劑于-30℃預凍13h至凍結狀態(tài)，得到預凍發(fā)酵劑；利用美國產6L?LABCONCO真空冷凍干燥機將預凍發(fā)酵劑于凍干溫度-55℃、真空度0.16mBar條件下，凍干48h至完全干燥狀態(tài)，得到產膽鹽水解酶乳酸菌干粉發(fā)酵劑。