[發明專利]家蠶質型多角體病毒熒光定量PCR檢測方法有效
| 申請號： | 201210004704.7 | 申請日： | 2012-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN102559929A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發明（設計）人： | 吳萍;郭錫杰;李龍;陳濤 | 申請（專利權）人： | 江蘇科技大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 樓高潮 |
| 地址： | 212003*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 家蠶 質型多角體 病毒 熒光 定量 pcr 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種家蠶質型多角體病毒熒光定量PCR檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)、以家蠶質型多角體蛋白基因的保守序列(SEQ?ID?No：1)為靶目標，設計特異性引物，擴增目的基因片斷；
(2)、利用步驟(1)所得片斷構建定量標準質粒；
(3)、提取樣品RNA，反轉錄合成cDNA；
(4)、實時熒光定量PCR檢測方法檢測樣本中的家蠶質型多角體病毒含量。
2.根據權利要求1所述的家蠶質型多角體病毒熒光定量PCR檢測方法，其特征是，步驟(1)和步驟(4)中，擴增時所用引物為：
正向引物：5′ATACAAGGTTGGCATTTCAGA?3’，
反向引物：5′ACCGCCGTTAGGATAGTAGAT?3’。
3.根據權利要求1所述的家蠶質型多角體病毒熒光定量PCR檢測方法，其特征是，步驟(2)中所述質粒使用的是pGEM-T?Easy。
4.根據權利要求1所述的家蠶質型多角體病毒熒光定量PCR檢測方法，其特征是，步驟(4)中，PCR反應體系為：95℃預變性3min；95℃?15s，60℃?1min，共40個循環。
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