[發(fā)明專利]Ephrin B2抗體及其應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201180053464.3
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN103237812A
• 公開（公告）日: 2013-08-07
• 發(fā)明（設計）人: 喬治·路易斯·馬丁內(nèi)斯托雷夸德拉達;瑪麗亞·安赫萊斯·阿本格扎爾因方特斯
• 申請（專利權）人: 國家腫瘤學研究中心基金會(CNIO)
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;A61K39/395
• 代理公司: 北京康信知識產(chǎn)權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 余剛;張英

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學和生物技術領域并且涉及能夠阻止血管（血管發(fā)生）和淋巴管（淋巴管生成）形成的一種新的ephrin?B2特異性抗體。此外，本發(fā)明涉及提到的抗體的應用，例如，用于制備藥物。?

背景技術

血管發(fā)生，或由已經(jīng)存在的血管形成新血管在胚胎發(fā)育和出生后的生命期間在許多生理過程中（繁殖，結瘢和發(fā)炎）起到重要作用。盡管將內(nèi)皮細胞轉變成血管原性表型的分子機制還不完全知道，但是它是一種復雜過程，涉及內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和裝配，隨后募集其他血管周細胞（例如周細胞或肌肉細胞）以及細胞外基質(zhì)的重塑（Risau,W.Nature1997,386:671-674）。在很多病癥中血管不受控制的增長是一種潛在的紊亂，例如類風濕性關節(jié)炎或糖尿病性視網(wǎng)膜病變，并且特別是腫瘤過程。腫瘤生長依賴于通過形成新血管網(wǎng)來連續(xù)供應氧氣和營養(yǎng)物，從而在缺乏足夠的血管形成時，細胞經(jīng)歷壞死和/或凋亡過程，這抑制或減緩腫瘤體積的增加。?

除了血管以外，脊椎動物的循環(huán)系統(tǒng)包含淋巴管，它們在生物體發(fā)育和病理期間也起到關鍵作用。淋巴系統(tǒng)引流組織的間隙液并將其運輸?shù)窖合到y(tǒng)中，還從消化系統(tǒng)中吸收脂類，淋巴系統(tǒng)是免疫系統(tǒng)的單獨的免疫防御運輸細胞的一部分，例如在炎癥中，以及在各種病理狀態(tài)誘導多種類型的淋巴水腫，炎性疾病，并且涉及癌癥的侵入和轉移（Tammela,T.and?Alitalo,K.Cell2010,140:460-76）。由以前存在的淋巴管的淋巴管生成或形成淋巴管的研究依然落后了幾十年，并且直到最近幾年才描述了生物分子機制和特異性標記，最近使用它們來研究腫瘤傳播和轉移過程。?

在胚胎發(fā)育期間，血管源于由中胚層衍生的內(nèi)皮前體（在稱為血管發(fā)生的過程中），然而淋巴管的形成似乎起始于來自頸部區(qū)域和中腎周圍的一組靜脈內(nèi)皮細胞。因為它們的共同胚胎來源，兩種維管系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)其?發(fā)育和成熟的相似的分子機制。已經(jīng)鑒定了數(shù)種信號通路，其中酪氨酸激酶受體在形成心血管系統(tǒng)的這些機制中起到非常重要的作用，尤其是，通過其相應的受體（VEGFR）與通過血管生成素調(diào)節(jié)的Tie-1和Tie-2受體的活性結合的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）信號通路（Thurston,G.,Cell?Tissue?Res2003;314:61-68）。此外，已經(jīng)顯示出另一組分子，ephrins（是“producing?hepatoma?erythropoietin?receptor?interactors”（“產(chǎn)生肝細胞瘤的促紅細胞生成素受體相互作用因子”）的首字母簡稱）連同它們相應的受體（Eph）一起，還涉及血管系統(tǒng)（Adams,RH?and?Klein,R.Trends?Cardiovasc?Med2000,10:183-188）和淋巴系統(tǒng)（,T?et?al.Genes?Dev2005,19:397-410）的重塑。該家族包含已知最大組的酪氨酸激酶（含有14個受體及8個配體），并且根據(jù)它們的序列同源性以及與相應配體的結合特性再細分成兩種受體類型（Eph?A和Eph?B）。Eph?A受體結合亞組ephrin?A的配體（其特征在于通過糖基磷脂酰肌醇（GPI）分子將其錨定在膜上），而Eph?B受體結合亞組ephrin?B的配體（其通過跨膜區(qū)域緊接著胞質(zhì)區(qū)域?qū)⑵溴^定在膜上）。已有報道動脈表達跨膜配體ephrin?B2而靜脈表達Eph?B4受體（Adams,RH?and?Alitalo?K.Nat?Rev?Mol.Cell?Biol2007,8:464-478）。?

該組分子通過改變細胞骨架的組織及影響整聯(lián)蛋白和其他胞內(nèi)粘附分子的活性來負責調(diào)控各種細胞功能，例如形態(tài)、遷移、排斥、細胞粘附和侵入。（Pasquale,EB.Cell2008,133:38-52）。這些活性依賴于細胞內(nèi)表達的Eph受體與在其他細胞內(nèi)表達的相應ephrin的相互作用，從而產(chǎn)生影響所涉及的每個細胞的雙向信號。來自Eph受體的信號稱為“正向”（“forward”）并依賴于位于其胞質(zhì)區(qū)內(nèi)的酪氨酸激酶結構域（它能夠磷酸化自身并且能夠磷酸化其他蛋白），并且依賴于受體與其他效應分子的結合。對于配體ephrin?B的部分，它產(chǎn)生另一個信號（稱為“反向”（“reverse”）），一方面其依賴于磷酸化其胞質(zhì)區(qū)中的數(shù)個酪氨酸（通過Src家族激酶和其他酪氨酸激酶受體來進行），并且另一方面依賴于其他相關蛋白。此外，大多Eph受體和ephrins?B在它們的胞質(zhì)區(qū)中具有與PDZ結構域的結合位點，其對于進行生理功能是很重要的，尤其是ephrins?B（,T?et?al.Genes?Dev2005;19:397-410）。?