[發明專利]酪氨酸-磷酸化的WBP2，一種新的癌癥靶和生物標記物

有效

• 申請號: 201180051871.0
• 申請日: 2011-08-25
• 公開（公告）號: CN103261895A
• 公開（公告）日: 2013-08-21
• 發明（設計）人: 林允斌
• 申請（專利權）人: 新加坡國立大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;A61K38/02;C07K2/00;A61K31/7105;C07H21/02;C12Q1/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

相關申請的交叉引用

本申請要求于2010年8月30日提交的新加坡專利申請第201006302-2號的權益，其全部內容援引加入本文。

技術領域

本發明一般涉及確定癌癥的傾向或者診斷和/或治療癌癥的方法和試劑盒。

背景技術

本發明的背景的以下討論是為了促進本發明的理解。但是，應當理解該討論不是承認或允許所提及的任何材料在本申請的優先權日期是公開的、已知的或任何管轄范圍中常見的一般知識的部分。

通過核激素受體增強基因轉錄包括其通過蛋白-蛋白相互作用與共激活蛋白和基礎轉錄復合物相互作用(1,2)。共激活蛋白可以作為轉錄接頭發揮作用，或者通過組氨酸乙酰轉移酶(HAT)或核小體重塑復合物修飾染色質。此外，共激活蛋白調節mRNA轉運、翻譯以及合成蛋白的翻譯后修飾。一些已知的核激素受體共激活蛋白包括共激活蛋白的p160家族成員、SRC-1、SRC-2[TIF-2/GRIP-l/NCoA-2]、SRC-3[pCIP/ACTR/AIB-l/RAC-3/TRAM-1]、NRIF-3、E6-AP和WBP2。由于它們的多效作用，轉錄共激活蛋白作為在癌癥發展中越來越多涉及的一組蛋白出現并不令人驚訝(3-5)。

轉錄共激活蛋白常進行翻譯后修飾，例如磷酸化。SRC/pl60家族蛋白的特定成員的磷酸化可以增加它們的核定位(6)，抑制它們與非核受體激活蛋白的相互作用(7)或者刺激它們內在的共激活蛋白活性(8)。AIB1和PGC-1的磷酸化調節它們的半衰期和活性(9,10)。此外，通過Pak1磷酸化NRIF3會通過增加的ERa-NRIF3相互作用促進ERa反式激活(5)。

WW-結構域結合蛋白(WBP2)為轉錄共激活蛋白，據證實其通過激素依賴性ERα/PR-WBP2相互作用選擇性和特異性地增強ERa和PR反式激活并將WBP2募集至激素應答元件(11)。WBP2包含內在的激活結構域。其3個聚脯氨酸(PPXY)基序之一-PY3對于其在ERα/PR反式激活中的共激活功能是必需的。其共激活蛋白活性可以通過YAP(Yes激酶相關蛋白)進一步增強，YAP還調節幾種轉錄因子，例如p73(12)、Runx2(13)、TEAD/TEF(14)和ErbB4(15)。

我們以前的研究已鑒定WBP2為新的酪氨酸激酶底物，其在乳腺癌發展的MCF10AT模型中表現出差異性磷酸化(16)。隨后證實外源表達的WBP2是EGFR的真實靶標。我們假設EGFR介導的WBP2的酪氨酸磷酸化在調節ERa功能和乳腺癌生物學中起作用。因此我們試圖描繪EGFR介導的WBP2的酪氨酸磷酸化的信號傳導途徑并研究WBP2磷酸化對其共激活蛋白活性的影響。還研究WBP2及其酪氨酸磷酸化對ER陽性乳腺癌生物學的作用以及深層機制。

發明內容

因此，本發明的一方面包括一種檢測患者的癌癥的方法，所述方法包括以下步驟：

a)測量在分離自患者的第一樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量；以及

b)將樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量與分離自正常的非癌性細胞的第二樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量進行比較，

其中相對于第二樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量，第一樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量的增加指示在第一樣品中存在癌癥。

優選地，第一和第二樣品中在Y192處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ED?No.1的多肽的量還檢測在SEQ?ID?No.1的多肽的Y231處酪氨酸的磷酸化，其中相對于第二樣品中在Y192和Y231處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量，第一樣品中在Y192和Y231處具有磷酸化的酪氨酸的SEQ?ID?No.1的多肽的量的增加指示在第一樣品中存在癌癥。

優選地，癌癥是由EGFR、c-Src、c-Yes、ER、Wnt、WBP2或E2F表達或活性引起，或者起始于或依賴于EGFR、c-Src、c-Yes、ER、Wnt、WBP2或E2F表達或活性。