[發(fā)明專利]用于在細(xì)胞培養(yǎng)物中生產(chǎn)病毒的過程中除去外來因子的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201180043396.2
• 申請日: 2011-07-06
• 公開（公告）號: CN103080304A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: F.M.I.科利格農(nóng);I.S.L.克諾特;J-P.J.J.馬泰塞
• 申請（專利權(quán)）人: 葛蘭素史密絲克萊恩生物有限公司
• 主分類號: C12N7/02
• 分類號: C12N7/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 梁謀

1.一種用于在細(xì)胞培養(yǎng)物中生產(chǎn)目標(biāo)病毒的方法，該方法包括：使細(xì)胞群體與包含目標(biāo)病毒的溶液接觸，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染，其特征在于，包含目標(biāo)病毒的溶液和易感細(xì)胞之間的接觸時(shí)間少于或等于120分鐘。

2.一種用于生產(chǎn)目標(biāo)病毒的方法，該方法包括下述步驟：

a)?使細(xì)胞群體與包含目標(biāo)病毒的溶液接觸少于或等于約120分鐘的時(shí)間段，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染；

b)?從該細(xì)胞除去包含目標(biāo)病毒的溶液，和

c)?在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞，以生產(chǎn)復(fù)制的目標(biāo)病毒群體。

3.一種用于生產(chǎn)目標(biāo)病毒的方法，該目標(biāo)病毒用于藥物中，該方法包括下述步驟：

a)?使細(xì)胞群體與包含目標(biāo)病毒的溶液接觸少于或等于約120分鐘的時(shí)間段，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染，

b)?從該細(xì)胞除去包含目標(biāo)病毒的溶液，

c)?在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞，以生產(chǎn)復(fù)制的目標(biāo)病毒群體，和任選地

d)?用合適的藥用載體配制生產(chǎn)的病毒。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中的任一項(xiàng)的方法，其中該包含目標(biāo)病毒的溶液包含一種或多種外來因子。

5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中該細(xì)胞易于被一種或多種外來因子感染。

6.一種用于生產(chǎn)目標(biāo)病毒的方法，該方法包括下述步驟：

a)?使細(xì)胞群體接觸包含該目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的初始溶液，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染，并且該接觸時(shí)間段足以允許該目標(biāo)病毒感染細(xì)胞群體的至少一個(gè)亞群，

b)?從該細(xì)胞除去該包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的溶液，

c)?在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞，以生產(chǎn)復(fù)制的目標(biāo)病毒群體，

其中與在包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的初始溶液中存在的DNA含量水平相比，在復(fù)制的目標(biāo)病毒群體中，該至少一種外來因子的DNA含量水平下降了至少90%。

7.一種用于在細(xì)胞培養(yǎng)物上生產(chǎn)目標(biāo)病毒的過程中除去外來因子的方法，該方法包括下述步驟：

a)?使細(xì)胞群體接觸包含該目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的初始溶液，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染，并且該接觸時(shí)間段足以允許該目標(biāo)病毒感染細(xì)胞群體的至少一個(gè)亞群，

b)?從該細(xì)胞群體除去包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的溶液，

c)?在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞，以生產(chǎn)復(fù)制的目標(biāo)病毒群體，

其中與包含目標(biāo)病毒和該至少一種外來因子的初始溶液相比，從復(fù)制的目標(biāo)病毒群體中除去或基本上除去該至少一種外來因子。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法，其中該接觸時(shí)間段少于或等于120分鐘。

9.一種用于在細(xì)胞培養(yǎng)物上生產(chǎn)目標(biāo)病毒的過程中除去外來因子的方法，該方法包括下述步驟：

a)?使細(xì)胞群體與包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的溶液接觸少于或等于約120分鐘的時(shí)間段，其中該細(xì)胞易于被該目標(biāo)病毒感染，

b)?從該細(xì)胞除去包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的溶液，

c)?在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細(xì)胞，以生產(chǎn)復(fù)制的目標(biāo)病毒群體。

10.根據(jù)權(quán)利要求6-9的方法，其中在步驟a)?中的接觸時(shí)間足以允許該目標(biāo)病毒吸附至細(xì)胞群體的至少一個(gè)亞群上。

11.根據(jù)權(quán)利要求7或權(quán)利要求9的方法，其中與在包含目標(biāo)病毒和至少一種外來因子的溶液中存在的DNA含量水平相比，在復(fù)制的目標(biāo)病毒群體中，該至少一種外來因子的DNA含量水平下降了至少90%。

12.根據(jù)權(quán)利要求6-11的方法，其中該細(xì)胞易于被一種或多種外來因子感染。

13.根據(jù)權(quán)利要求2-12中的任一項(xiàng)的方法，其中使用在步驟c)處得到的復(fù)制的目標(biāo)病毒群體作為包含目標(biāo)病毒的溶液用于根據(jù)另一個(gè)步驟a)與細(xì)胞群體進(jìn)行接觸，將步驟a)至c)的系列重復(fù)至少1次。

14.根據(jù)權(quán)利要求1-13中的任一項(xiàng)的方法，其中該接觸時(shí)間段是在10秒至120分鐘、1分鐘至30分鐘、5分鐘至15分鐘范圍內(nèi)，是10分鐘。

15.根據(jù)權(quán)利要求1-14中的任一項(xiàng)的方法，其中該細(xì)胞是哺乳動(dòng)物細(xì)胞、禽類細(xì)胞或昆蟲細(xì)胞。