[發(fā)明專利]確定慢性腎病分期的方法、其設(shè)備和操作所述設(shè)備的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201180036730.1
• 申請(qǐng)日: 2011-05-30
• 公開（公告）號(hào): CN103026218A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田仲紀(jì)陽(yáng);河野雅弘;佐藤惠美子;藤原功一
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 田仲紀(jì)陽(yáng)
• 主分類號(hào): G01N27/62
• 分類號(hào): G01N27/62;G01N30/26;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/88
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 張國(guó)梁

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于確定慢性腎病的分期的方法和設(shè)備，以及用于操作所述設(shè)備的方法。

背景技術(shù)

慢性腎病(CKD)是一種進(jìn)展的疾病，指示腎損傷的發(fā)現(xiàn)或腎功能惡化不進(jìn)行治療時(shí)長(zhǎng)期持續(xù)的狀態(tài)。隨著其進(jìn)展，所述疾病導(dǎo)致晚期腎衰竭，并且如果不進(jìn)行人工透析或腎臟移植，生存將變得困難。

晚期腎衰竭在全球范圍內(nèi)增長(zhǎng)。為了治療這種疾病，認(rèn)為早期治療和早期檢測(cè)，特別是在疾病是所謂的“隱藏的慢性腎病”時(shí)的檢測(cè)是重要的。

據(jù)稱日本目前有大約13,300,000名CKD患者。這表示8名成年人中大約有1人就是CKD患者。

在透析患者中最常發(fā)生的原發(fā)病是糖尿病性腎病，其是三種主要的糖尿病并發(fā)癥中的一種。由于糖尿病性腎病是CKDs中的一種，因此患有糖尿病的患者可能患有CKD。按照2006年的國(guó)家健康和營(yíng)養(yǎng)檢查調(diào)查(健康、勞動(dòng)和福利部(Ministry?ofHealth，Labor?and?Welfare))估計(jì)糖尿病患者的人數(shù)為8,200,000人，包括潛在的糖尿病患者為18,700,000人。由于假定這些患者中的30％將發(fā)展腎衰竭，在將來(lái)CKD患者的人數(shù)將持續(xù)增長(zhǎng)。例如，日本每年用于透析治療的醫(yī)療費(fèi)用約為5,400,000日元/人，總共為1.5萬(wàn)億日元。由于透析患者的人數(shù)增長(zhǎng)，透析治療所需要的醫(yī)療費(fèi)用也在增長(zhǎng)。因此，減少這些醫(yī)療費(fèi)用的措施是急需的。由于這一原因，腎損傷的早期檢測(cè)、防止癥狀加重的早期治療、以及最終盡可能減少導(dǎo)入透析的患者人數(shù)在全世界認(rèn)為是重要的。

CKD按照腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)分期，腎小球?yàn)V過(guò)率是腎功能的評(píng)價(jià)指標(biāo)。即，按照GFR(NPL1)，CKD分成五期。

然而，這樣進(jìn)行的CKD分期的確定是基于血清肌酸酐濃度。由于血清肌酸酐濃度受肌肉量的強(qiáng)影響，因此，存在問題，如排除這樣的影響進(jìn)行準(zhǔn)確的確定是困難的。此外，由于直到估算的GFR(eGFR)變?yōu)?0％以下時(shí)才觀察到血清肌酸酐濃度的增加，因此難以發(fā)現(xiàn)微小的腎損傷。盡管如此，還沒有開發(fā)出替代前述方法的適當(dāng)?shù)拇_定方法。

引用列表

非專利文獻(xiàn)

NPL1：2007年5月23日修訂的CKD?Shinryo?Guide[用于慢性腎病的診斷和治療的臨床實(shí)踐指南(Clinical?Practice?Guidebook?for?Diagnosis?and?Treatment?of?Chronic?Kidney?Disease)]的第12-13頁(yè)，由日本腎臟學(xué)會(huì)(Japanese?Society?of?Nephrology)編輯，2009年出版。

發(fā)明概述

技術(shù)問題

本發(fā)明的目的在于提供一種用于確定慢性腎病的分期的方法和設(shè)備，以及用于操作所述設(shè)備的方法。

問題的方案

經(jīng)過(guò)持續(xù)的反復(fù)試驗(yàn)，本發(fā)明人進(jìn)行了各個(gè)分期之間的CKD患者的透析前血漿和透析前尿液的準(zhǔn)確比較，并且努力尋找一種低分子量化合物，所述低分子量化合物的含量認(rèn)為與分期進(jìn)展有關(guān)系。

經(jīng)過(guò)這樣持久的努力，本發(fā)明人最終發(fā)現(xiàn)存在這樣一種低分子量化合物，其含量隨著分期進(jìn)展而增加。此外，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)存在僅在特定的分期中觀察到的低分子量化合物。并且，作為廣泛研究的結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)這樣的特定的低分子量化合物在血漿中的含量可以用作適當(dāng)確定慢性腎病的分期的指標(biāo)。

具體地，本發(fā)明如下述：

(I)用于確定慢性腎病的分期的方法

[I-1]

一種用于確定患有腎病的受試者中的慢性腎病的分期的方法，所述方法包括下述步驟：

(A-1)通過(guò)用液相色譜/飛行時(shí)間質(zhì)譜在下文所示的特定條件下處理來(lái)自所述受試者的樣品，確定至少一種選自由下文所示的標(biāo)記(1)-(16)組成的組的標(biāo)記的含量，和

(B-1)通過(guò)將已經(jīng)在步驟(A-1)中測(cè)定的每種標(biāo)記在來(lái)自所述受試者的樣品中的含量與在每個(gè)分期中確定的參照含量范圍進(jìn)行比較，而確定由每個(gè)標(biāo)記指示的分期：

液相色譜條件

液相色譜設(shè)備：Agilent1100系列(Agilent)；

柱：Cadenza?C182x150mm，3μm(Imtakt)；

前置柱(Pre-column)：TCI?OPTI-GUARD?Fit?ODS(TCI)；

移動(dòng)相A：0.05％甲酸；

移動(dòng)相B：乙腈；

對(duì)于梯度洗脫：

0-15min：移動(dòng)相A中5％至95％的移動(dòng)相B的線性梯度，