[發明專利]檢測和/或定量沙門氏菌屬物種的肽核酸探針，試劑盒和方法和其應用

有效

• 申請號: 201180017179.6
• 申請日: 2011-03-29
• 公開（公告）號: CN102939390A
• 公開（公告）日: 2013-02-20
• 發明（設計）人: N·F·里貝羅品托德奧利維拉阿澤維多;M·J·洛佩茲達克斯塔維埃拉;C·M·費爾南德斯阿爾梅達;C·W·齊威爾
• 申請（專利權）人: 米尼奧大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 羅菊華

1.用于檢測和/或定量沙門氏菌屬（Salmonella）的PNA探針，其特征在于，其包含與SEQ?ID?NO:1－5’-AGG?AGC?TTC?GCT?TGC-3’具有至少86%相似性的至少1個序列。

2.權利要求1的PNA探針，其特征在于，其包含以下序列中的至少一種：

●SEQ?ID?NO:1－5’-AGG?AGC?TTC?GCT?TGC-3’；

●SEQ?ID?NO:2－5’-TCA?GGA?GCT?TCG?CTT-3’；

●SEQ?ID?NO:3－5’-GGA?GCT?TCG?CTT?GCG-3’；

●SEQ?ID?NO:4－5’-TCA?GGA?GCT?TCG?CTT?GC-3’；

●SEQ?ID?NO:5－5’-AGG?AGC?TCC?GCT?TGC-3’。

3.權利要求1的PNA探針，其特征在于，其能檢測沙門氏菌屬（Salmonella）rRNA，rDNA或rRNA的序列互補中的靶序列。

4.權利要求1的PNA探針，其特征在于，其額外地包含與SEQ?ID?NO:5－5’-TGC?AGG?ATT?CTC?TGG-3’具有至少86%相似性的1個序列。

5.權利要求1～4之任一項的PNA探針，其特征在于，其被連接于至少一種類型的可檢測的級分。

6.權利要求5的PNA探針，其特征在于，探針的可檢測的級分的類型選自下列之一：綴合物，分支的檢測系統，生色團，熒光團，放射性同位素，酶，半抗原或發光化合物。

7.權利要求6的PNA探針，其特征在于，熒光基團是下列中的至少一種：Alexa系列，Alexa?Fluor系列的熒光團，花青苷，5-(及-6)羧基-2',7'-二氯熒光素，5-ROX（5-羧基-X-若丹明,三乙基銨鹽）。

8.用于檢測沙門氏菌屬（Salmonella）的試劑盒，其特征在于，其包含權利要求1～7之任一項中描述的探針中的至少一種。

9.權利要求8的試劑盒，其特征在于，其還包含以下溶液中的至少一種：一種固定溶液，一種雜交溶液及一種洗滌溶液。

10.權利要求9的試劑盒，其特征在于，固定溶液包含多聚甲醛和乙醇，即2～8%（wt/vol）的多聚甲醛和25～90%（vol/vol）的乙醇。

11.權利要求9的試劑盒，其特征在于，雜交溶液包含甲酰胺。

12.用于檢測沙門氏菌屬（Salmonella）的方法，其特征在于，其使用權利要求1～7中描述的PNA探針，且其包括以下步驟：

（a）PNA探針與生物學樣品接觸；

（b）PNA探針與存在于所述的樣品中的微生物的靶序列雜交；

（c）作為指示所述的樣品的所述的檢測和定量的雜交檢測。

13.權利要求12的方法，其特征在于，生物學樣品源于血，空氣，食品，水或活組織檢查。

14.權利要求12的方法，其特征在于，雜交由熒光發生。

15.權利要求1～7之任一項中描述的PNA探針的用途，其特征在于，其應用于檢測生物學樣品中的沙門氏菌屬（Salmonella?spp.）物種的方法。

16.權利要求8～11之任一項中描述的試劑盒的用途，其特征在于，其應用于檢測生物學樣品中的沙門氏菌屬（Salmonella?spp.）物種。